酵母菌發酵棉粕對黃羽肉雞肌肉主要脂肪酸組成的影響
蛋白飼料資源緊缺和價格的不斷飆升，已經成為我國畜牧業發展的主要瓶頸之一。棉粕因為資源豐富，蛋白含量高且價格較豆粕、魚粉等蛋白原料低而備受青睞，但其中游離棉酚的存在使其利用受到限制。棉粕通過微生物發酵不但可以有效降解其中的游離棉酚含量，還可增加其營養價值，具有改善肉雞生長性能、屠宰性能、增強免疫力等作用。然而，發酵棉粕對于肉雞肌肉脂肪酸組成的影響未見報道。脂肪酸的含量是判斷肌肉品質的重要指標之一。硬脂酸(C18：0)、軟脂酸(C16：0)、油酸(C18：1)、亞油酸(C18：2)是禽肉中主要的脂肪酸，其含量約占總脂肪酸的85％。95％。因此，本研究就酵母菌發酵棉粕對黃羽肉雞肌肉中這4種主要脂肪酸組成進行分析，為棉粕的深度利用和發酵棉粕生物飼料作為功能性蛋白飼料的開發提供依據。
1材料與方法
1．1試驗材料
發酵底物：棉粕、玉米、麩皮。
發酵菌種：熱帶假絲酵母ZD一3、釀酒酵母均由浙江大學飼料所選育提供。
培養基：酵母膏胨葡萄糖(瓊脂)培養基，酵母膏：蛋白胨：葡萄糖=1：2：2，葡萄糖溶液用無菌濾器過濾后單獨加入，固體培養基瓊脂添加量為2％。
1．2發酵棉粕的制備
發酵棉粕底物按照棉粕70％、玉米20％、麩皮10％混合均勻，底物與水為1：0.8，發酵棉粕制備參考文獻，未發酵底物加入等量的培養基，其余過程與發酵底物進行同樣的處理。
1．3試驗設計
將300只1 13齡黃羽肉雞飼喂商品飼料育雛14d后，再飼喂對照組日糧預飼7d，以適應試驗粉狀飼料。然后從中選取180只健康的體重相近的肉雞，隨機分為3組，即對照組(CG組)、單酵母發酵棉粕組(CT組)，復合酵母發酵棉粕組(cr組)，每組6個重復，每個重復10只雞(公母各半)。其中CG組、CT組和CF組分別加入未發酵棉粕底物、熱帶假絲酵母發酵棉粕和熱帶假絲酵母與釀酒酵母復合發酵棉粕，添加量均為6％。試驗期42 d，分21～42日齡和43～64日齡兩個階段，飼養管理按常規進行，各組日糧組成及營養水平見表1。
1．4樣品采集及預處理
在42和“日齡，每個重復隨機選取接近平均體重的2只雞，每組共12只，空腹12 h后，頸動脈放血致死。從每只雞的相同部位分離胸肌和腿肌約20 g，一80℃保存。分析前將樣品室溫解凍、剪碎，在真空冷凍干燥機中干燥24 h后迅速粉碎，用于肌肉脂肪酸分析。
1．5肌肉脂肪酸分析
取100 mg冷凍干燥樣品，加入l mL混合提取溶劑(甲醇：氯仿：水=8：4：3，體積比)，冰浴勻漿5 min、振蕩5 min、超聲10 min，然后在4℃以10 000 r／min離心5 min，取上清液。上清液中加入500μL氯仿和500 μL水，振蕩5 min，靜置分層后取下層分離液，用溫和氮氣吹干。加入0.5 mol／L的氫氧化鉀甲醇溶液500 μL，漩渦混合2 min，60 ℃水浴甲酯化20min，冰水冷卻。再加入正己烷500μL，加入飽和氯化鈉溶液500μL，振蕩萃取3min，4℃以10 000 r／min離心5 min后取上清液，用氣相色譜儀(6890N型，安捷倫公司)進行分析。
氣相色譜條件：FID檢測器，色譜柱DD—WAX石英毛細管柱(30rex0.25 minX0.25μm)。進樣口溫度250℃，進樣量lμL，分流比為10:1，載氣流量1．5 mL／min。采用程序升溫：50℃保持2 min，10 ℃／min到170 ℃，保持10 min；4 ℃／min到180℃，保持10 min；2℃／min到220℃，保持10 min。檢測器溫度300℃，氫氣流量40 mL／min，空氣流量400 mL／min，尾吹流量45 mL／min。
通過與標準樣品的保留時間來確定脂肪酸，結果用單個脂肪酸的峰面積占總甲酯化脂肪酸峰面積的百分比表示。
1．6數據處理與分析
飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的含量由脂肪酸的組成計算所得。試驗數據采用SPSS 16.0軟件One—way ANOVA進行分析，用LSD法進行多重比較。結果以(平均值±標準差)表示，顯著性水平為P<0.05。
2結果與分析
2．1發酵棉粕對2l一42日齡肉雞胸肌主要脂肪酸組成的影響
發酵棉粕對21～42日齡肉雞胸肌主要脂肪酸組成的影響見表2。由表2可知，較CG組而言，CF組顯著降低油酸的相對含量(P<0.05)，而各試驗組中亞油酸的含量顯著增jJI(P<0.05)。試驗組間及試驗組與對照組軟脂酸、硬脂酸、飽和脂肪酸及不飽和脂肪酸的含量、不飽和脂肪酸／飽和脂肪酸的比值均沒有顯著性的變化(P>0．05)。
2．2發酵棉粕對21～42日齡肉雞腿肌主要脂肪酸組成的影響
發酵棉粕對21。42日齡肉雞腿肌主要脂肪酸組成的影響見表3。由表3可知，與CG組相比，試驗組中軟脂酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、飽和脂肪酸、不飽和脂肪的含量及不飽和脂肪酸，飽和脂肪酸的比值均未發生顯著變化，而且試驗組間脂肪酸組成也沒有顯著性的改變(P>0.05)。
2．3發酵棉粕對43～64日齡肉雞胸肌主要脂肪酸組成的影響
發酵棉粕對43～64日齡肉雞胸肌主要脂肪酸組成的影響見表4。由表4可知，與CG組相比，CT組油酸含量和不飽和脂肪酸／飽和脂肪酸的比值顯著增加，硬脂酸和亞油酸含量顯著降低(P<0.05)，而軟脂酸、飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的含量無變化(P>0.05)；CF組除軟脂酸含量顯著增加外，其余脂肪酸含量均未發生顯著變化(P>0.05)。試驗組間各脂肪酸及飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸及不飽和脂肪酸／飽和脂肪酸的比值差異顯著(P<0.05)。
2．4發酵棉粕對43～64日齡肉雞腿肌主要脂肪酸組成的影響
發酵棉粕對43～64日齡肉雞腿肌主要脂肪酸組成的影響見表5。由表5可知，與CG組相比，試驗組亞油酸含量顯著增加(JP<0.05)，軟脂酸、硬脂酸、飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的含量及不飽和脂肪酸／飽和脂肪酸的值無顯著變化(P>0.05)；CT組油酸含量顯著降低(fk0.05)。與CT組相比，CF組軟脂酸含量顯著降低，而其余脂肪酸含量及飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸及不飽和脂肪酸／飽和脂肪酸的比值變化差異不顯著(D0.05)。
3 討論
肉雞日糧中發酵棉粕的添加對脂肪酸組成的影響可能是發酵過程中產生的代謝產物或者是酵母益生菌所引起，具體原因及對肌肉品質更為詳盡的影響有待進一步研究。吳買生等陸1研究表明，在育肥豬日糧中添加復合益生菌調理劑可以增加肌肉中單不飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸含量，從而改善豬肉品質。王娟娟等H1研究了日糧添加中發酵飼料對生長育肥豬脂肪品質的影響，結果發現發酵飼料可顯著提高豬背最長肌肌內脂肪的含量，增加油酸和總單不飽和脂肪酸的含量，降低亞油酸和總多不飽和脂肪酸的含量，對硬脂酸和軟脂酸的含量沒有產生明顯的影響。本試驗在肉雞日糧中添加發酵棉粕，結果顯示可以顯著改變肉雞主要脂肪酸組成，而且對胸肌和腿肌的影響有所差異，這種改變對43。64日齡肉雞表現更為明顯，尤其是胸肌，這說明發酵棉粕對肉雞脂肪酸的影響具有時間效應。此外，發酵棉粕所用菌種不同也表現出了明顯的差異。就43～64日齡胸肌而言，熱帶假絲酵母發酵棉粕顯著增加其不飽和脂肪酸／脂肪酸的比值，而復合發酵棉粕顯著增加其軟脂酸含量。發酵棉粕對肉雞脂肪酸組成的調節作用表明其具有改變肉雞肌肉風味的潛力。因為不飽和脂肪酸是影響其風味的主要物質。
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