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1.1 分析方法

1.1 試驗動物與試驗設計

試驗采用完全隨機設計，選擇體重相近的 28日齡的斷奶仔豬 180 頭，隨機分成 3 個組，每組 4個重復，每個重復 15 頭仔豬。對照組飼喂基礎飼糧，基礎飼糧為參照 NＲC(2012)豬(10～20 kg)營養需要配制的顆粒狀配合飼料，其組成及營養水平見表 1;抗生素組在基礎飼糧中添加 75 g /t 金霉素 +50 g /t 吉他霉素 +10 g /t 維吉尼亞霉素;釀酒酵母培養物組在基礎飼糧的基礎上添加 5 kg /t 的釀酒酵母培養物，釀酒酵母培養物由河南邑鴻善成生物技術有限公司提供。

1.2 飼養管理

試驗開始前對空豬舍進行清掃消毒，仔豬在28 日齡斷奶后稱重分組轉到保育舍，試驗正式開始，試驗期 38 d。飼喂采用自由采食的方式，每天08:30、14:00 和 18:00 上料，上料量隨仔豬日齡逐漸增加，保證料槽不空料。試驗期間仔豬采用自動飲水器自由飲水。每周一、周四進行豬舍消毒，每周一、周四、周日進行衛生大清掃，每天 09:00-16:00 開窗通風換氣，舍內裝有地暖以及保溫燈，將舍內溫度控制在 20 ℃ 以上。每天 08:00 觀察仔豬糞便腹瀉情況。其他日常管理按豬場常規要求進行。

1.3 測定指標與方法

1.3.1 生長性能

飼養試驗期間，于試驗第 1 天和最后 1 天對每重復仔豬空腹 16 h 后稱重，以重復為單位記錄試驗期 間 仔 豬 的 總 采 食 量，計 算 平 均 日 采 食 量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

腹瀉率:每天 08:00 觀察仔豬糞便情況，統計每天腹瀉仔豬頭數，計算腹瀉率。

腹瀉率(%)= 腹瀉仔豬數 × 腹瀉天數/(仔豬總數 × 試驗總天數)。

1.3.2 養分消化率

采用內源指示劑法，測定飼糧和糞中酸不溶灰分含量，以重復為單位，于試驗第30天開始連續3 d采集新鮮無污染糞樣以及飼糧樣品，測定粗蛋白質、粗脂肪、鈣和磷的表觀消化率。

1.3.3 盲腸微生物區系

于飼養試驗結束的第 2 天每個重復隨機挑選1 頭健康仔豬進行屠宰，取盲腸內容物于 －80 ℃冰箱保存。采用 DNA 試劑盒提取樣品總 DNA 后，根據保守區設計得到的引物，擴增 16S rＲNA 基因V3～V4 可變區，用 Illumina HiSeq 2500 進行測序。高通量測序得到的原始圖像數據文件，經堿基識別分析轉化為原始測序序列(sequenced reads)。使用 FLASH 軟 件，通 過 overlap 對 每 個 樣 品 的reads 進行拼接。使用 Trimmomatic 軟件，對拼接得到的 Ｒaw Tags 進行過濾。使用 QIIME 軟件中的 UCLUST 對 Tags 在 97%的相似度水平下進行聚類，獲得操作分類單元(OTU)，并基于 Silva(細菌)和 UNITE(真菌) 分類學數據庫對 OTU 進行分類學注釋。將 OTU 的代表序列與微生物參考數據庫進行比對可得到每個 OTU 對應的物種分類信息，進而在門和屬水平統計各樣品群落組成，繪制成物種組成柱狀圖。

1.4 數據統計及分析

采用 SPSS 17.0 軟件對試驗數據進行統計分析，結果 以 平 均 值 ± 標 準 差 的 形 式 表 示。采 用ANOVA 程序對試驗結 果 進 行 方 差 分 析，采 用Duncan 氏法進行多重比較，P＜0.05 為差異顯著。

2.1 釀酒酵母培養物對斷奶仔豬生長性能的影響

由表 2 可知，抗生素組平均日采食量最高，對照組平均日采食量最低，但是 3 組之間無顯著性差異(P＞0.05);抗生素組和釀酒酵母培養物組平均日增重均顯著高于對照組(P＜0.05)，但這 2 組之間沒有顯著性差異(P＞0.05);抗生素組和釀酒酵母培養物組料重比及腹瀉率均顯著低于對照組(P＜0.05)，但這 2 組之間沒有顯著性差異(P＞0.05)。

釀酒酵母培養物中含有豐富的營養物質，可以提高動物的生長性能。李曉研究發現在斷奶仔豬飼糧中添加 0.5%的釀酒酵母培養物顯著提高了斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量。VanDer Peet-Schwering 等研究發現添加釀酒酵母培養物可以顯著提高斷奶仔豬的平均日增重，改善料重比。這與本研究結果基本一致。本研究發現飼糧添加釀酒酵母培養物顯著提高了斷奶仔豬的平均日增重，改善了料重比。釀酒酵母培養物對生長性能的影響可能與釀酒酵母培養物的營養成分有關，釀酒酵母培養物提供了氨基酸、多肽、蛋白質、維生素和有機酸等豐富的營養物質，優化了飼糧的營養價值，同時也提供了大量的消化酶，提高了飼糧的養分消化率，從而降低了料重比。Ignacio 等認為釀酒酵母培養物中含有的醇類和酯類等芳香類物質以及核苷酸、多肽等增味類物質，可以改善飼糧的適口性，從而增加動物的采食糧，有利用動物日增重的提高。同時本研究結果發現飼糧添加釀酒酵母培養物可以顯著降低仔豬的腹瀉率，這與郭小華等、何若鋼等的研究結果一致。不僅如此，Magalhaes 等給 70 日齡的荷斯坦犢牛飼糧添加釀酒酵母培養物，結果改善了犢牛的腹瀉指數。釀酒酵母培養物可以降低腹瀉率，這可能與釀酒酵母培養物中的成分有關，釀酒酵母培養物中的有效成分包括酵母壁多糖，酵母壁多糖的主要成分是 β － 葡聚糖和甘露寡糖。Spring 等認為釀酒酵母細胞壁成分中的甘露聚糖能夠刺激腸道中富含 D－ 甘露糖的接收器，該接收器能黏附具有傘狀菌毛的革蘭氏陰性菌如沙門氏菌;White 等認為酵母細胞壁多糖能夠增強斷奶仔豬在感染大腸桿菌和沙門氏菌后的抵抗能力;而大腸桿菌和沙門氏菌是導致動物腹瀉的主要致病性微生物。

養分消化率體現的是動物對營養物質消化吸收的能力，動物養分消化率的提高可以改善動物的料重比。目前對于酵母培養物提高動物養分消化率的研究結果不一致。劉學文等在斷奶羔羊飼糧中添加酵母培養物顯著提高了斷奶羔羊飼糧中粗蛋白質消化率;王衛正等在瀨兔飼糧中添加酵母培養物，結果顯著提高了斷奶瀨兔飼糧中粗蛋白質的表觀消化率;張嘉琦等在蛋雞飼糧中添加 0.6%的酵母培養物，結果顯著提高了蛋雞飼糧中粗蛋白質的表觀消化率;劉觀忠等在蛋雛雞飼糧中添加酵母培養物，結果提高了蛋雛雞飼糧中粗蛋白質、粗脂肪和磷的表觀消化率;杜泓明研究發現添加酵母培養物顯著提高了斷奶仔豬飼糧中干物質、粗蛋白質和粗纖維的表觀消化率;而吳徐俊研究發現酵母培養物對斷奶仔豬飼糧中能量和粗蛋白質表觀消化率沒有影響;張麗研究發現酵母培養物顯著降低了斷奶仔豬飼糧中粗蛋白質、粗纖維、鈣和磷的表觀消化率。之所以出現這樣的情況，可能與生產酵母培養物時選用的菌株不同及生產工藝不同有關。本研究結果顯示飼糧添加釀酒酵母培養物可以顯著提高斷奶仔豬飼糧中粗蛋白質、粗脂肪和磷的表觀消化率。釀酒酵母培養物提高養分消化率可能由于釀酒酵母培養物中含有豐富的消化酶，這些消化酶可以補充斷奶仔豬剛斷奶時自身消化酶的不足，幫助仔豬對營養物質的消化分解;并且釀酒酵母培養物中還含有大量的營養物質，楊敏等認為釀酒酵母培養物中的葡萄糖、植酸酶等成分可以提高磷的表觀消化率。

Chao 指數和 Ace 指數衡量物種豐度即物種數量的多少;Shannon 指數和 Simpson 指數用于衡量物種多樣性，受樣品群落中物種豐度和物種均勻度的影響。相同物種豐度的情況下，群落中各物種具有越大的均勻度，則認為群落具有越大的多樣性，Shannon 指數值越大，Simpson 指數值越小，說明樣品的物種多樣性越高，本試驗結果顯示飼糧添加釀酒酵母培養物和抗生素對盲腸微生物的多樣性沒有顯著性影響。這與杜泓明的研究結果不一致，可能是由于酵母菌株以及飼養環境的不同導致的。本研究結果顯示釀酒酵母培養物組、對照組和抗生素組 3 組之間在門水平上的優勢菌組成沒有差異，但是盲腸微生物優勢菌群的菌群豐度有影響，飼糧添加釀酒酵母培養物顯著降低了斷奶仔豬盲腸中螺旋體門的相對豐度。螺旋體門多為致病菌或條件致病菌，對仔豬腹瀉具有潛在的誘導作用。研究發現，添加釀酒酵母培養物有提高普雷沃氏菌屬相對豐度的趨勢。張麗萍等研究發現普雷沃氏菌屬與豬的脂肪率和背膘厚度呈現正相關。普雷沃氏菌屬可以分解纖維素產生脂肪酸，有利于仔豬對營養物質的消化吸收，降低料重比。本研究還發現飼糧添加釀酒酵母培養物顯著降低了大腸埃希菌 － 志賀菌屬和密螺旋體屬 2 等腸道致病菌的相對豐度，而大腸埃希菌 － 志賀菌屬是仔豬腸道內的潛在致病菌，能引起仔豬的腹瀉。釀酒酵母培養物能抑制有害菌的生長，這可能與釀酒酵母培養物中的酵母壁多糖成分有關。酵母壁多糖中的甘露寡糖和 β －葡聚糖可以抑制有害菌生長，甘露寡糖具有和動物腸道黏膜上皮細胞特異性的寡糖受體相似的結構，可以與致病菌的外源凝集素結合，將病原菌排出體外，從而阻止致病菌與腸道細胞的結合，保護斷奶仔豬腸道的健康，降低仔豬因為腸道致病菌感染導致的腹瀉。

4結 論