3 試驗魚及飼養管理

養殖試驗在廣東溢多利生物科技股份有限公司產學研基地室內循環水養殖系統中進行試驗魚以重復為單位飼養于試驗缸每個試驗缸內大小為0.6m×0.7m×0.7m(有效水體250L)。飼養期間，每天定時定點投喂(08:30、12:30和16:30)，投喂30 min后收集剩料，烘干稱重，并根據攝食情況調整投喂量。飼養期間，每日吸污，同時更換1/10~3/10的水量；水溫保持在(27.0±2.0) ℃，pH保持在7.0±0.5，溶解氧濃度>6mg/L。

4 指標測定

4.1 生長性能指標

分別在正式試驗開始前和結束后，對各組試驗魚進行計數和稱重，計算體增重率(weight gain rate, WGR)、特定生長率(specific growth rate, SGR)、攝食量(feed intake, FI)、飼料系數(feed conversion rate, FCR)。各指標計算公式如下：

WGR(%) =100×[試驗末重(g) -試驗初重(g)]/試驗初重(g)；

SGR(%) =100×[ln試驗末重(g) -ln試驗初重(g)]/試驗天數(d)；

FCR=攝食量(g) /增重(g) 。

4.2 飼料、全魚常規營養成分分析

養殖試驗開始和結束時，將試驗魚分別饑餓24 h，用干毛巾吸干魚體表面的水分后稱重。在養殖試驗開始前，取6尾魚進行初始全魚營養成分分析。在56 d的養殖試驗結束后，每缸取2尾魚(每組6尾)，用自封袋裝好后置于-20 ℃冰箱中保存，用于全魚營養成分分析。飼料、魚體的常規營養成分含量采用AOAC(1995)法測定，具體方法如下：在105 ℃烘箱中烘至恒重后測定水分含量；分別采用凱氏定氮法(氮×6.25)和索氏提取法測定粗蛋白質和粗脂肪含量；在馬弗爐中灼燒(550℃)后測定粗灰分含量；分別采用乙二胺四乙酸(EDTA)絡合滴定法和鉬黃比色法測定鈣、磷含量。

4.3 營養物質表觀消化率測定

在養殖試驗開始后2周，每天在投喂后采用虹吸的方法收集糞便，每天收集2次。然后用鑷子選擇新鮮、完整的、外表帶有包膜的糞便于-20 ℃冰箱中保存。試驗結束后將收集到的糞便集中，并在烘箱中烘干(60 ℃)備用。測定糞便中粗蛋白質、鈣、磷以及飼料和糞便中釔含量，其中釔含量的測定采用等離子體發射光譜法，其他指標的測定方法同1.4.2。營養物質表觀消化率的計算公式如下：

干物質表觀消化率(%)=100×[1-(飼料中Y2O3含量/糞便中Y2O3含量)]；

某營養物質(粗蛋白質、鈣或磷)表觀消化率(%)=100×[1-(糞便中該營養物質含量/飼料中該營養物質含量)×(飼料中Y2O3/糞便中Y2O3含量)]。

4.4 血清生化指標測定

飼養試驗結束后，每組隨機選擇15尾魚，用經肝素鈉試劑潤洗后的注射器尾靜脈采血，離心制備血清后存儲于-80 ℃冰箱中。血清中谷草轉氨酶(glutamic oxalacetic transaminase, GOT)、谷丙轉氨酶(glutamate pyruvate transaminase, GPT)、溶菌酶(lysozyme, LZM)活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量均采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒進行測定，具體測定步驟參照試劑盒說明書。

4.5 腸道消化酶活性測定

快速分離經采血后魚體的腸道，再用液氮速凍后保存于-80 ℃冰箱中。腸道中消化酶如胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、淀粉酶(amylase)、脂肪酶(lipase)活性以及上清液中蛋白質含量均采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒進行測定，具體測定步驟參照試劑盒說明書。

5 數據統計及分析

本試驗所有數據均采用平均值±標準差(mean±SD)表示，采用SPSS 18.0對數據進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并結合Duncan氏法對組間數據進行多重比較，以P<0.05作為差異顯著水平。

結果與分析

1 生長性能

由表3可知，低磷低魚粉組的WGR和SGR均顯著低于對照組(正常磷和正常魚粉組，下同)(P<0.05)。與低磷正常魚粉組相比，在其飼料中添加植酸酶能夠使WGR提高11.03%(P<0.05)、SGR提高4.71%(P<0.05)、FCR降低9.60%(P

2 體成分

由表4可知，低磷低魚粉組的全魚鈣和磷含量均顯著低于對照組(P<0.05)。與低磷正常魚粉組和正常磷低魚粉組相比，在其飼料中分別添加植酸酶和蛋白酶均能夠顯著提高全魚鈣和磷含量(P

3 腸道消化酶活性

由表5可知，低磷低魚粉組的胰蛋白酶、糜蛋白酶和淀粉酶活性顯著低于對照組(P<0.05)。與低磷正常魚粉組和正常磷低魚粉組相比，在其飼料中分別添加植酸酶和蛋白酶均能夠顯著提高胰蛋白酶、糜蛋白酶和淀粉酶活性(P

4 營養物質表觀消化率

由表6可知，低磷低魚粉組的干物質、粗蛋白質、鈣和磷的表觀消化率均顯著低于對照組(P<0.05)。與低磷正常魚粉組和正常磷低魚粉組相比，在其飼料中分別添加植酸酶和蛋白酶均能夠顯著提高干物質、粗蛋白質、鈣和磷的表觀消化率(P

5 血清生化指標

由表7可知，低磷低魚粉組的LZM活性顯著低于對照組(P<0.05)，而MDA含量顯著高于對照組(P<0.05)。與低磷正常魚粉組和正常磷低魚粉組相比，在其飼料中分別添加植酸酶和蛋白酶均能夠顯著提高LZM活性和降低MDA含量(P

討論

1 低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對草魚生長性能的影響

在飼料中添加酶制劑既能降解植物性飼料原料中的抗營養因子，同時還可彌補機體內源消化酶的不足，從而促進動物對飼料的消化利用，提高飼料報酬，促進生長。植酸酶可有效降解飼料中的植酸，不僅釋放出與之螯合的磷，同時還可將鈣和蛋白質等營養物質釋放出來供動物吸收利用，減少氮、磷的排泄，提高營養物質利用率，從而促進動物生長。張曉清等的研究表明，添加300 mg/kg植酸酶能夠提高建鯉的體增重。Lu等的研究表明，添加200 mg/kg植酸酶能夠促進黑鯛的生長，且可以使飼料中磷酸二氫鈣的水平從1.5%降至1.0%。在以植物蛋白質為主要蛋白質源的飼料中，添加植酸酶能夠促進植酸磷水解，促進鯽魚(Carassius auratus)生長。本試驗結果顯示，低磷飼料中添加300 mg/kg植酸酶能夠提高草魚的WGR和SGR，促進生長。這可能是因為添加的植酸酶降解了飼料原料中的植酸，釋放出的營養物質改善了草魚的營養狀態，從而達到了促進生長的作用。蛋白酶能夠通過水解植物性蛋白質原料中的抗營養因子，提高水解產物中易被消化吸收利用的氨基酸的含量，還能激活內源消化酶活性，從而提高動物對植物性蛋白質的利用率。本試驗結果顯示，低魚粉飼料中添加500 mg/kg蛋白酶同樣能夠提高草魚的WGR和SGR，促進其生長。Li等在羅非魚上的研究顯示，飼料中添加175 mg/kg的蛋白酶能夠顯著提高增重，改善生長性能。在虹鱒上的試驗結果表明，低魚粉飼料中添加175 mg/kg蛋白酶能夠提高WGR和降低FCR，且提高率和降低率分別達到9.42%和7.80%。在異育銀鯽上的試驗也有相似的研究結果，低魚粉飼料中添加不同水平的蛋白酶(120、150和175 mg/kg)均能提高其體增重，且提高率分別達到5.73%、22.40%和14.38%。但在虹鱒的報道中顯示，飼料中添加蛋白酶對虹鱒的生長性能無顯著影響。不同試驗結果存在差異可能與試驗飼料類型，試驗魚種類、大小，酶制劑來源和養殖環境不同有關。

目前，植酸酶和蛋白酶的復合使用在部分水產動物上已有報道。在建鯉上的試驗表明，低磷(1.5%→1.0%)無魚粉(6%→0)飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠使WGR提高8.88%。在羅非魚上的試驗表明，低磷(1.8%→1.2%)無魚粉(6%→0)飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠使WGR提高13.03%。草魚是我國主要大宗水產養殖經濟魚類，其肌肉中含有豐富的多不飽和脂肪酸，具有重要的保健功能，深受消費者的喜歡。本研究結果顯示，在低磷(2.0%→1.3%)低魚粉(3.0%→1.5%)飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠提高草魚的WGR和SGR，且提高率分別達到15.71%和6.87%，此結果與上述學者的研究結果相似，表明飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠促進動物生長，說明不同酶制劑的配伍使用使得酶功能產生了協同作用，發揮了較大的經濟效益。但是，與對照組相比，低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶后各生長指標還是低于對照組，這可能是由于降低了魚粉在飼料中的使用量，導致魚粉中一些微量營養元素不能滿足魚體生長所需，從而造成些許差異。

2 低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對草魚體成分的影響

關于植酸酶和蛋白酶對動物體成分的影響已有諸多研究報道。Shi等的研究顯示，在低魚粉飼料中添加不同水平的蛋白酶(120、150和175 mg/kg)，對異育銀鯽體成分(水分、粗蛋白質、粗脂肪和粗灰分含量)無顯著影響。Lin等的研究顯示，飼料中添加由蛋白酶、β-葡聚糖酶和木聚糖酶組成的復合酶制劑對羅非魚全魚水分、粗蛋白質、粗脂肪和粗灰分含量無顯著影響。張曉清等的研究顯示，低磷無魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對建鯉全魚水分、粗蛋白質、粗脂肪和粗灰分含量均無顯著影響。此外，張瑞的研究顯示，飼料中添加植酸酶能夠提高建鯉肌肉粗蛋白質含量，但對粗脂肪和粗灰分含量無顯著影響。張璐等在大黃魚上的研究也有類似的結果，飼料中添加200 mg/kg植酸酶對全魚粗蛋白質、粗脂肪含量和總能無顯著影響。本試驗結果顯示，各組之間在草魚全魚水分、粗蛋白質、粗脂肪和粗灰分含量方面均無顯著差異，該結果可能說明魚類的營養組成相對穩定，不易受到飼養環境和營養條件的影響；但低磷低魚粉組全魚鈣、磷含量要低于對照組，表明低磷低魚粉組中的鈣、磷不能滿足魚體的生長需要，從而導致生長性能的下降；而在低磷低魚粉飼料中補充植酸酶和蛋白酶后，其鈣、磷的營養狀況有所改善。這說明植酸酶和蛋白酶在水解飼料原料時，會釋放出鈣、磷等營養物質，促進礦物元素的沉積，從而提高動物對營養物質的利用。

3 低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對草魚營養物質表觀消化率的影響

飼料的營養價值是影響動物生長的重要因素，而生產上常用消化率來評價飼料的營養價值，進而考察其對動物生長的影響。動物的生長與干物質、粗蛋白質等營養物質表觀消化率呈正相關。Biswas等的研究發現，在用豆粕部分替代魚粉的飼料中添加2000 U/kg植酸酶，能夠顯著提高真鯛(Pagrus major)蛋白質和磷的表觀消化率，且分別較豆粕對照組提高3.26%和60.04%。在斑點叉尾鮰上的試驗表明，飼料中添加植酸酶能夠提高粗蛋白質、粗脂肪和磷的表觀消化率。同樣，在羅非魚上也有相似的研究結果。在以豆粕、葵籽粕和菜籽粕分別部分替代魚粉的飼料中添加蛋白酶、葡聚糖酶和木聚糖酶能夠提高虹鱒的粗蛋白質和粗脂肪表觀消化率。在異育銀鯽上的試驗表明，飼料中添加蛋白酶能夠提高干物質和蛋白質的表觀消化率。本試驗結果表明，低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠提高草魚對干物質、粗蛋白質、鈣和磷的表觀消化率。這可能是由于植酸、蛋白酶抑制因子等抗營養成分對魚類的消化酶活性有抑制作用，從而抑制了營養物質的消化吸收。植酸酶和蛋白酶的添加一方面可以釋放出與植酸結合的營養物質，促進其消化吸收利用，另一方面也能夠激活部分內源酶，從而改善腸道對營養物質的消化利用。因此，本試驗繼續對植酸酶和蛋白酶對草魚腸道消化酶活性的影響進行了研究。

4 低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對草魚腸道消化酶活性的影響

動物的生長與消化能力密切相關，而消化能力受到消化酶活性的影響。胰蛋白酶、糜蛋白酶、淀粉酶以及脂肪酶是動物胃腸道中消化營養物質的關鍵酶。Liu等的研究發現，外源脂肪酶的添加能夠通過提高草魚腸道中胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性提高草魚的消化能力，從而達到促進生長的作用。關于植酸酶和蛋白酶對動物腸道消化酶活性的影響已有諸多報道。在異育銀鯽上的試驗表明，飼料中添加植酸酶能夠提高肝胰臟和腸道蛋白酶活性。在鯉魚上的試驗表明，低魚粉飼料中添加蛋白酶能夠高前腸和食糜蛋白酶活性。本試驗結果表明，在低磷正常魚粉飼料中添加植酸酶，正常磷低魚粉飼料中添加蛋白酶以及低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶均能在不同程度上提高草魚腸道中胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性，與上述研究結果相似。其原因可能是植物蛋白質源中含有的抗營養因子(植酸、蛋白酶抑制因子等)可與飼料中的蛋白質、糖類和礦物質等結合，導致底物釋放不徹底，對消化酶活性有抑制作用。而植酸酶和蛋白酶可水解飼料原料中的植酸和蛋白酶抑制因子，充分釋放結合部分，刺激機體內源消化酶的分泌，從而提高消化酶活性。此外，在淀粉酶和脂肪酶上的研究顯示，飼料中添加植酸酶對鱸魚(Lateolabrax japonicus)胃和腸道中淀粉酶和脂肪酶的活性的影響不顯著。常青等的研究報道，蛋白酶的添加對魚體消化器官淀粉酶和脂肪酶的活性無顯著影響。本研究結果顯示，飼料中添加植酸酶和蛋白酶可提高腸道淀粉酶的活性，但對脂肪酶的活性無顯著影響。綜上所述，外源酶制劑的添加能夠通過提高消化酶活性，增強動物腸道對營養物質的消化吸收，從而促進生長。而出現部分試驗結果不一致的原因可能與酶的種類、用量，魚的品種、大小，飼料配方以及養殖環境有關。

5 低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶對草魚血清生化指標的影響

血液中的有效成分可以反映機體新陳代謝機能、組織及細胞通透性和健康狀態。GOT和GPT主要參與機體組織中氨基酸的轉運。在本試驗條件下，各組草魚血清中GOT和GPT活性無顯著差異，這與張曉清等在建鯉上的研究結果相似。LZM是魚類先天性免疫系統中的重要殺菌物質，主要通過破壞病原菌的細胞壁，進而導致病原菌裂解、死亡。MDA是體內氧自由基攻擊生物膜中多不飽和脂肪酸而產生的重要產物，可以反映細胞受損傷以及脂質過氧化程度。Adeoye等研究發現，飼料中添加植酸酶、蛋白酶和木聚糖酶能夠增加羅非魚血清中LZM活性。另一篇在羅非魚上的研究也有相似的結果，飼料中添加木聚糖酶、蛋白酶、α-淀粉酶和纖維素酶能夠提高血清中LZM活性。而在鱘魚(Acipenser baeri Brandt ♀×A. schrenckii Brandt)上的試驗表明，低魚粉飼料中添加植酸酶對血清LZM活性無顯著影響，但能降低血清MDA含量。本試驗結果顯示，低磷低魚粉飼料中添加植酸酶和蛋白酶能夠提高草魚血清中LZM活性和降低MDA含量。這些結果說明植酸酶和蛋白酶的添加能夠改善草魚的先天性免疫狀況。這可能是因為植酸酶和蛋白酶的添加提高了動物體對蛋白質及其他營養成分的利用率，同時也促進了免疫相關因子的合成，進而提高了機體的免疫力。

結論

在低磷(2.0%→1.3%)正常魚粉(3.0%)飼料中添加0.03%植酸酶、正常磷(2.0%)低魚粉(3.0%→1.5%)飼料中添加0.05%蛋白酶、低磷(2.0%→1.3%)低魚粉(3.0%→1.5%)飼料中添加0.03%植酸酶和0.05%蛋白酶均能夠提高草魚的營養物質表觀消化率、腸道消化酶活性和免疫力，從而改善其生長性能。

養殖凈化酵素產品說明書

1000毫升/瓶，市場售價約120元，可以用于約10頭育肥豬或約200只家禽凈化體內抗生素等殘留、改善肉蛋品質（提升口感風味）。純益生菌+酶制劑生物制品，無任何違禁物質（客戶可以去質檢部門進行檢測，我們也可以為您提供質檢報告）。

關于對本產品效果的質疑，最簡單的做法就是你自己購買一瓶回來進行試驗，拿一些所謂的“飼料雞鴨”、淘汰種畜禽、“飼料豬”、水產品等進行試驗，運用半個月左右后，看看是否達到了肉蛋變得自然香醇、甜美（請親朋好友進行品鑒，特別是湯水比較未使用的區別很大，非常自然甜香，豬排骨和雞肉變得微微翠香）？也可以去檢測抗生素、激素殘留是否下降或消失了？如果你有條件進行的更好檢測條件，運用前后進行檢測肌肉中的脂肪、游離氨基酸如油酸和亞油酸等是否這些含量提高了？如果這些都看到了效果肯定了你就按照自己的思路放開手腳做了；如果看不出效果你的損失最多也就是120元（投資購買了這個產品進行試驗）。

原料組成：植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、超敏蛋白酶、復合氨基酸、助劑、載體等。

本產品的主要作用是在畜禽和水產品上市前半個月左右使用，能夠在短時間快速降低畜禽、水產動物體內的抗生素和部分重金屬殘留，同時降低養殖環境臭味和動物體內外腥燥味，提升肉蛋奶的自然風味（肉質中的脂肪與游離氨基酸如油酸、亞油酸等提高），形成高品質肉蛋奶品牌產品。本產品無任何違禁物質，使用后更利于動物產品檢測合格率。

【用法用量】在畜禽與水產上市前半個月左右開始使用。先將本品1瓶（1000毫升）放入100公斤清水中（低溫季節用溫水），分別加入每瓶約550毫升的1-3瓶啤酒、食鹽500克（另外加入500克以上的白糖效果更好，混合液密封保存要求15天內用完），靜止半小時后拌料500公斤（全價飼料，不要與單一的飼料混合飼喂，否則營養不全效果反而不明顯），或者加入1噸飲水中飼喂動物。可以超量使用效果更快，但最高使用量不超過2倍（如果僅需要解決肉品中抗生素、激素殘留過高問題，不同殘留值、不同動物與水產品可以在使用本品2-7天后再進行檢測或許問題就解決了）。

如果運用期間配合部分發酵飼料、發酵中草藥或者加入如養豬、養雞、鴨鵝、牛羊、水產養殖專用復合益生菌，養殖環境除臭和肉質改良等效果更快更明顯，還會明顯增重。

本品1瓶運用15天可以分別滿足約10頭育肥豬或200只三黃雞的肉質風味品質改良所需用量（僅供參考）。運用期間不要再使用抗生素等，以免影響使用效果。

正在繁育中的母畜、種蛋禽可以減半使用具有一定的保健效果。

要達到更好的改良效果，與產品“土味十足動物肉質（風味）改良劑”合起來使用將達到更加滿意的效果（如下圖，兩個產品均按照說明書使用）。“土味十足動物肉質（風味）改良劑”詳細介紹點擊這里了解→土味十足動物肉質（風味）改良劑，快速清除抗生素殘留，肌肉緊實肥肉減少，半個月左右達到肉質自然香醇土味十足。

【包裝規格】1000mL /瓶（凈含量），12瓶/箱

【保 質 期】24個月(陰涼、干燥保存)。

相關鏈接——

①.99多功能飼料發酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態飼料發酵劑，更輕易成功、效果更好的生物飼料發酵劑，簡單好用的中草藥發酵劑 

②.99多功能飼料發酵劑，酶菌結合飼料發酵劑中的佼佼者，幾項數據對比讓你信服

③.【視頻】部分發酵飼料養豬雞鴨帶給你無臭味健康無抗養殖效果

④.【視頻】發酵豆渣養豬新技術

⑤.御瘟湯——防控非洲豬瘟增加自制發酵中草藥體內外運用的原生中草藥配方

⑥.動物促生長增肥原生中草藥組方——效果直觀可見，生長速度提高顯著，降低料耗提前出欄

⑦.“土味十足”原生中草藥配方——效果顯著的動物肉蛋品質改良中草藥配方，比放養更土味十足

⑧.效果極佳的“多功能增強型雙黃連散”原生中草藥組方 

⑨.一種快速促進豬雞鴨快速生長增重的中草藥配方和運用方法

10.豬場復產成功案例，防控非洲豬瘟運用自制發酵中草藥更易成功，不需大設施投入成本低廉

11.創業養殖場先種好牧草，享受政策和降低養殖風險路更寬

12.2020年多年生禾本科高產牧草品種推薦，亞熱帶與大棚內可四季產出，提供專業種植、加工、利用、形成生態循環一條龍服務

13.養殖場廢水（污水）最簡單的快速處理技術，達標農灌水或者變成無臭味不燒苗的液態有機肥技術

14.新建豬場用哪種模式好？新型水泡糞技術模式節約30%以上建設成本與減少70%以上糞污處理環保建設

15.豬場復養如何才能成功？推薦自制發酵中草藥組合拳模式！數百成功案例歡迎驗證

16.豬場發現疑似感染非洲豬瘟后如何快速控制下來（20余天達到滿意效果，有大量成功案例）

17.養殖場托管找廣西助農公司，無專業技術員也能夠高效益生產，總有一種模式適合你

18.養殖場環保與糞污資源化利用找廣西助農公司，聯系我們