1、材料與方法

1.1試驗材料

采集一頭牛牧場未發霉、品質優良的揉絲玉米秸稈。試驗所用的枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌、假絲酵母菌、地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌、米曲霉菌和葡萄糖氧化酶(2000μ/g)均，活菌數1.0X108CFU/mL。

1.2試驗設計

試驗采用單因素完全隨機設計，設置未發酵玉米秸稈為對照組（CK），6個試驗組，分別為3個復合菌組，即T1組（枯草芽孢桿菌50%、植物乳桿菌25%、假絲酵母菌25%）、T2組（地衣芽孢桿菌50%、植物乳桿菌25%、假絲酵母菌25%）、T3組（枯草芽孢桿菌50%、米曲霉菌25%、假絲酵母菌25%），3個復合菌酶組，即TG1組(T1+0.5%葡萄糖氧化酶)、TG2組(T2+0.5%葡萄糖氧化酶)、TG3組(T3+0.5%葡萄糖氧化酶)，每組3個重復。將揉絲玉米秸稈切短至4~5cm，按試驗設計，干物質基礎上將1kg玉米秸稈、0.5%尿素、2%硫酸錢、5%復合菌(菌液形式加入)、0.5葡萄糖氧化酶混合均勻，袋裝抽真空封口發酵，發酵60d后開包分別取對照組和試驗組樣品，分析發酵玉米秸稈的常規營養成分、霉菌毒素、瘤胃發酵參數和體外消化率。

1.3測定指標與方法

1.3.1常規營養成分

采集對照組樣品和試驗組發酵好的玉米秸稈，根據試驗需要量，稱取樣品并檢測發酵后秸稈常規營養成分含量。采用烘干法測定干物質（DM）；凱氏定氮法測定粗蛋白(CP)；濾袋法測定粗纖維(CF)；灼燒法測定粗灰分(Ash)；洗滌纖維分析法測定中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維（ADF）；高錳酸鉀法測定鈣(Ca)；分光光度法測定磷(P)。

1.3.2霉菌毒素

稱取適量對照組玉米秸稈和發酵后的樣品，根據高效液相法操作步驟進行檢測，霉菌毒素主要測定黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇等。

1.3.3瘤胃發酵參數

選擇3頭年齡、生理狀態、生產性能相近，發育正常，體況良好的荷斯坦奶牛，晨飼前使用瘤胃液采集管經口腔收集新鮮瘤胃液，迅速裝入充滿二氧化碳的塑料瓶中，保溫（39℃）快速帶回實驗室并用4層紗布過濾。參考方法配制緩沖液，準確稱取1g樣品，加入50mL瘤胃液和150mL緩沖液，分裝完成后置于震蕩培養箱中39℃培養，分別記錄9個時間點(3、6、9、12、24、18、36、48、72h)的產氣量，體外培養72h后終止。培養液pH用pH計測定;氨態氮(NH3-N)采用苯酚-次氯酸鈉比色法測定；微生物蛋白(MCP采用考馬斯亮藍色法測定；揮發性脂肪酸(VFA)采用氣相色譜法測定。

1.3.4體外消化率

干物質體外消化率(IVDMD)、粗蛋白體外消化率(IVCPD)、中性洗滌劑纖維體外消化率(IVNDFD)和酸性洗滌劑纖維體外消化率(IVADFD)通過活體外兩階段法測定。將纖維袋在65℃烘1h，未加樣品的纖維袋做空白，稱量2g樣品，封口并放入培養瓶中，迅速將每個培養瓶中按照1:3的比例加入提前預熱至39℃的瘤胃液和緩沖液，充分混合并充入CO2，蓋上橡膠塞并密封。將培養瓶置于體外模擬培養箱中39℃恒溫培養48h，培養完成后棄培養液，加入2L酸性胃蛋白酶溶液(1L0.lmol/LHCL中加入2g胃蛋白酶)繼續培養48h，培養結束后，用冷水洗滌終止反應。在105℃烘箱中烘至恒重，準確稱重測定DM含量，采用凱氏定氮法測CP含量，范氏洗滌纖維分析法測定NDF、ADF含量，IVDMD、IVCPD、IVNDFD及IVADFD計算公式如下:

IVDMD=樣品DM含量-未消化DM含量)/樣品DM含量×100%

IVCPD=(樣品CP含量-未消化CP含量)/樣品CP含量×100%

IVNDFD=(樣品NDF含量-未消化NDF含量)/樣品NDF含量×100%

IVADFD=(樣品ADF含量-未消化ADF含量)/樣品ADF含量×100%

1.4統計分析

試驗數據采用Excel2010軟件進行初步統計，再用SAS8.1軟件進行單因素完全隨機設計的方差分析，結果采用平均值士標準差表示，以P<0.05作為差異顯著性判斷標準。

2、試驗結果

2.1菌酶協同處理玉米秸稈的常規營養成分

由表1可知，TG1組和TG2組DM和CP含量高于對照組（P<0.01）；復合菌酶組Ca含量高于復合菌組(P<0.01)；T1組P和Ash含量高于其他組(P<0.01)；T2組、T3組和復合菌酶組NDF含量低于對照組(P<0.01)，TG2組最低；6個試驗組CF和ADF含量低于對照組(P<0.01)。

注:同行數據肩標小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)，大寫字母不同表示差異極顯著(P

2.2菌酶協同處理玉米秸稈的霉菌毒素

由表2可知，TG2組和T2組黃曲霉毒素B1含量高于其他組(P<0.01)，但均在安全范圍內（黃曲霉B1≤30μg/kg，玉米赤酶烯酮≤500μg/kg，脫氧雪腐鐮刀菌烯醇≤1000μg/kg）；復合菌酶組玉米赤霉烯酮含量高于復合菌組(P<0.01)；T1組脫氧雪腐鐮刀菌烯醇含量低于除TG3組的其他組(P<0.01)。

2.3瘤胃發酵參數

由表3可知，試驗組培養液pH低于對照組(P<0.01)，試驗組間差異不顯著，但TG2組最低；復合菌酶組6h和12h產氣量高于對照組(P<0.05），TG2組最高；TG2組36h,48h和72h產氣量高于T1組、T3組和對照組(P<0.05），但與TGl組、TG3組和T2組之間差異不顯著；T2組6、12、36、48h和72h產氣量與復合菌酶組差異不顯著；T1組、T2組和復合菌酶組NH3-N含量高于對照組(P<0.01)；復合菌酶組MCP含量高于對照組(P<0.01)，復合菌組MCP含量與對照組差異不顯著。

由表4可知，復合菌酶組和復合菌組乙酸、丙酸、丁酸含量均高于對照組(P>0.05)，TG1組和TG2組戊酸和總揮發性脂肪酸含量高于對照組(P<0.05)。

2.4體外消化率由表5可知，復合菌酶組IVDMD高于復合菌組和對照組(P<0.01),TG2組最高;復合菌酶組IVCPD高于T1組、T3組和對照組(P<0.01)，3個復合菌組間IVCPD差異不顯著；TG2組IVNDFD高于其他組(P<0.01)；各處理組IVADFD均高于對照組(P<0.01)，但試驗組間差異不顯著。

3、討論

3.1菌酶協同處理玉米秸稈對常規營養成分含量的影響

3.1.1ADF和NDF含量

我國玉米秸稈資源豐富，但其粗纖維含量高、粗蛋白含量低、適口性差，嚴重影響反芻動物采食量和消化吸收效率，NDF和ADF含量可反映飼料品質，NDF影響反芻動物的瘤胃充盈度和采食量，NDF含量與飼料能量呈反比，ADF含量與有機物消化率成反比。玉米秸稈的揉絲微生物發酵技術逐步興起，經秸稈揉搓機操作，縱向拉絲揉搓，微生物發酵后可制成適口性好、營養價值高的飼料，本研究中，T2組、T3和復合菌酶組NDF含量低于對照組，6個試驗組ADF含量低于對照組。說明菌酶制劑協同處理玉米秸稈可以降低NDF和ADF含量，可能由于早期地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌、假絲酵母菌和GOD協同作用改變玉米秸稈中纖維結構，提高乳酸含量，進而軟化秸稈木質纖維，促進纖維素的釋放和降解。采用菌種和酶制劑協同發酵玉米秸稈，可降解纖維素、半纖維素等，促進發酵，提高飼料利用率，研究表明，采用酶菌復合制劑處理玉米秸稈其NDF、ADF含量顯著降低。

3.1.2DM和CP含量

DM含量反映飼料的營養價值和品質，可用于衡量制備粗飼料的過程中養分的流失與保留。本研究中，TG1組和TG2組DM和CP含量顯著高于對照組，說明地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌、假絲酵母菌與GOD協同發酵玉米秸稈，提高DM和CP含量的效果最好，可能是由于地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌和GOD的協同效果，促進假絲酵母菌分泌胞外酶，促進秸稈中木質纖維素降解，充分利用發酵底物，合成自身蛋白質。研究表明采用黃孢原毛平革菌和復合酶制劑協同處理玉米秸稈，其DM和CP含量增加。采用不同菌種與酶制劑混合處理水稻秸稈，結果顯示試驗組DM和CP含量高于對照組。報道，添加生物制劑處理玉米秸稈，CP含量降低與本試驗結果不同，可能是因為采用的菌和酶制劑種類和發酵時間不同，發酵過程中微生物種類存在差異，對營養物質的利用方式不同，進而引起DM含量差異。

3.2菌酶協同處理玉米秸稈對產氣量的影響

秸稈中可發酵性碳水化合物能被發酵培養液中的瘤胃微生物利用，產生較多的揮發性脂肪酸、CH4和CO2等氣體。體外產氣法可快速評估飼料的營養價值，反映瘤胃中微生物的生物活性、飼料降解效率和發酵程度。產氣量與可發酵性碳水化合物含量呈正比，飼料的營養價值越高，微生物活性越強，產氣量也就越高。本試驗中，TG2組48h產氣量高于復合菌組和對照組，說明發酵過程中地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌協同效果較好，添加菌種可能與原有菌群相互促進，且在GOD作用下充分利用發酵底物，維持內環境穩定，進而提高酶活性和發酵效果，與研究結論一致。

3.3菌酶協同處理玉米秸稈對瘤胃發酵參數的影響

3.3.1pH

優質青貯飼料應具有較高的乳酸含量和較低的pH和丁酸水平。pH可反映發酵過程中酸堿平衡關系，由可吸收的營養成分決定。本研究中，試驗組培養液pH顯著低于對照組，且TG2組最低，pH降低可能因為加入地衣芽孢桿菌和植物乳桿菌協同GOD促進營養物質吸收利用，產生乳酸及其他有機酸，且在體外試驗中沒有瘤胃壁不能吸收，造成揮發性脂肪酸積累，引起pH降低，這與研究結果相同。

3.3.2NH3-N和MCP含量

NH3-N是瘤胃中飼料含氮物質分解的最終產物，可促進微生物合成蛋白質，反映瘤胃內微生物氮的供應狀況，瘤胃內微生物所需最佳濃度為6.30~27.50mg/dL。瘤胃內NH3-N濃度過低，限制纖維素的分解和微生物合成蛋白質，過高經機體代謝排出體外，造成浪費。MCP是反芻動物最主要的氮源，在充足的情況下，能量是MCP合成的第一限制性因素，主要取決于可發酵碳水化合物的發酵速率，與微生物生長效率成正比。本研究中，試驗組NH3-N濃度是21.20~24.93mg/dL，均在最適范圍內，T1組、T2組和復合菌酶組NH3-N含量高于對照組，復合菌酶組MCP含量高于對照組，說明復合菌與GOD處理玉米秸稈利于提高MCP和NH3-N含量，可能是發酵過程中GOD促進有益菌生長，提高消化酶活性，協同植物乳桿菌促進秸稈中纖維素分解，釋放出的營養物質含量增加，枯草芽孢桿菌促進蛋白利用，地衣芽孢桿菌促進腸道吸收，地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌和GOD相互促進，進而MCP含量升高。服道菌酶協同處理玉米秸稈，NH3-N含量降低，與本試驗結果相反，可能是由于發酵初期，TG2組復合菌協同GOD分解蛋白質效果較好，使NH3-N含量升高。

3.3.3VFA

VFA是反芻動物瘤胃中飼料的碳水化合物和蛋白質的最終分解產物，可為畜禽機體提供70%~80%的能量，可反映瘤胃內環境穩定性和瘤胃發酵狀況。VFA的主要組分是乙酸、丙酸和丁酸，乙酸可促進提高畜禽體脂率，丙酸可促進機體轉化和貯存葡萄糖，丁酸能為機體組織提供所需能量。本研究中，試驗組總VFA含量高于對照組，表明復合菌及其與GOD協同處理玉米秸稈，均可促進營養物質的利用，進而提高VFA產量，且菌酶協同效果更佳。VFA含量升高可能是因為發酵過程中菌酶協同且分泌大量蛋白酶、消化酶等，充分利用秸稈中的營養物質，這與研究結果一致。

3.4體外消化率

體外消化率可反映養分被消化利用的難易程度與微生物對飼料的降解效果，影響干物質采食量和生產性能。本研究中，TG2組IVDMD、IVCPD、IVNDFD和IVADFD高于其他組，可能是GOD促進地衣芽孢桿菌和植物乳桿菌合成豐富的消化酶，軟化秸稈木質纖維，打破纖維結構的束縛，破壞細胞壁結構，促進細胞內容物的釋放，研究結果一致。

4、結論

本試驗結果顯示，地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌、假絲酵母菌與GOD組DM、CP含量最高，NDF和ADF含量較低，各項霉菌毒素含量均在安全范圍內；體外產氣培養液pH最低，6、12、36、48h和72h產氣量、VFA及MCP含量顯著提高；營養物質體外消化率有所改善。因此，TG2組菌酶協同作用效果最好，以期為后續生產提供理論基礎。

本產品是一種以高濃度乳酸菌和酵母菌等組合酶菌結合的復合專業飼料發酵劑產品，可以發酵我們常見的大部分飼料原料、農家飼料、農產品與食品加工下腳料，制作活性EM菌液與制作青貯飼料，具有發酵、除霉、降解纖維、提高發酵飼料營養與適口性且能夠長時間保存等功能，具有操作簡單成功率高、成本低廉等特點。

活力99增香增甜飼料發酵劑，高濃度乳酸菌、酵母菌專業酶菌結合飼料發酵劑，多功能飼料發酵劑，青貯飼料發酵劑_生態養殖環境治理_生態產品_高效生態養殖技術網 (fjc001.com)

本產品符合飼料衛生標準

【生產許可證號】桂飼添（2021）H01001

【產品執行標準】Q/NNWR 02-2021（飼用復合微生物添加劑Ⅰ）

【適用對象】畜禽、水產、環保

【原料組成】酵母菌、芽孢桿菌、乳酸菌等，復合酶制劑與載體等。

【產品成分分析保證值】酵母菌、芽孢桿菌、乳酸菌等合計≥100億cfu/g，水分＜9.0%。

凈重：200 克/袋。

本產品是在活力99生酵劑的基礎上的升級產品，升級了増香增甜等功能效果。

鑒別本產品真假與效果的簡單方法：500毫升左右的礦泉水瓶子中放入約50克大米+300毫升35℃左右的溫水，加入本產品5克，幾個小時就會產生大量香醇氣體，72小時內大米基本溶解為乳狀。做試驗時請切記要注意礦泉水瓶炸開的安全。

產品使用說明書

（一）制作加強型活性EM菌液

在非金屬容器中將本品1包（200克）與1公斤紅糖（也可以用5公斤大米或玉米等含淀粉類的飼料代替）放入約50公斤溫水中，簡單密封48小時后就變成了加強型活性EM菌液（每毫升活菌在100億左右）。其使用方法如下：

1.在畜禽上的使用方法：根據不同動物與飼養周期按其飼料重量的0.1%-0.5%拌入飼料或飲水中后飼喂或飲用。

2.養殖場緊急除臭生物消毒：取加強型活性EM菌液兌水30倍清水，對產生臭味與異味的養殖區域、糞污水道、糞堆、污水池進行噴灑，以噴灑表面濕潤為準，接待參觀前1-3小時補噴一次效果更好。

3.制作青貯飼料：每噸青貯飼料中加入10公斤加強型活性EM菌液，簡單噴灑在料上壓實密封發酵15天以上。

4.養殖水產上的使用：每畝使用5公斤加強型活性EM菌液進行噴灑，晴天進行噴灑后注意增氧。

（二）制作各種發酵飼料

本品能夠發酵木薯渣、豆渣、米粉面條加工下腳料、剩菜剩飯、米糠、統糠、菌糠、酒糟、果渣果皮、青黃秸稈、牧草、紅薯藤、輕度霉變飼料等各種廉價飼料（下腳料）、各種飼料原料與全價飼料等，每500公斤待發酵原料加入本品1-2包（或50公斤上述加強型活性EM菌液）、20公斤以上的玉米粉或其它含淀粉類的飼料原料、1公斤食鹽（含有足夠食鹽的原料就不添加），含水量調節到約60%，壓實密封發酵2-7天左右有濃郁香味時即可使用。發酵后飼料的適口性、營養、消化率較未發酵前有明顯提升。發酵后的飼料根據不同動物與不同飼養周期按照10%-50%與該動物其它全價飼料混合后飼喂（先少量飼喂適應后逐漸增加的原則），不可以單獨飼喂或全部飼喂發酵飼料。

（三）發酵水產動物飼料成高濃度乳酸菌保健品

①部分發酵飼料運用：100公斤水產飼料、50公斤清水、本品1包密封發酵7天以上變成高濃度乳酸菌發酵飼料，以10%比例與水產動物飼料混合后飼喂，或者發酵飼料單獨飼喂；②全部發酵飼料飼喂：也叫輕度發酵飼料技術，300公斤水產全價飼料、本品1包、水120公斤混合發酵24小時全部飼喂，這種預消化結合大量乳酸菌飼喂能夠顯著改善水產動物腸道健康、水質改善等優點。

（四）發酵部分禽糞做飼料

發酵雞糞（鴿子糞、兔糞等）作豬、魚等動物飼料，本品2包、100公斤玉米粉其它含淀粉類的飼料原料、500公斤雞糞，加入適量麥麩或米糠調節含水量約為55%-60%，覆蓋薄膜進行發酵，一周左右有濃郁香味時即可使用，可代替飼料20%左右，用于喂豬或魚類等。

（五）發酵菜粕、棉粕、花生餅、茶枯脫毒

原料1000公斤，玉米面其它含淀粉類的飼料原料100公斤，食鹽2公斤，含水量調節到55%左右，本品2包，簡單地攪拌均勻，密封發酵15天以上成為高濃度乳酸菌小肽豐富的生物蛋白飼料，喂前攤開透氣10分鐘再作為蛋白質原料使用于自配飼料中，可以等蛋白代替豆粕和玉米粉如：17%的發酵菜粕=10%的豆粕+7%的玉米粉，降低成本提高使用效果。

（六）中草藥及中藥渣發酵方法

1.固態中草藥發酵技術：將50公斤中草藥粉碎，越細越好放入40公斤的35℃左右的溫水中，加入玉米粉與豆粕各5公斤、本品1-2包、食鹽100克，放入塑料容器內壓實密封發酵7天以上后使用，密封可以保存一年以上，按照飼料比例的1%以上添加到飼料或飲水中使用。

2.液態中草藥發酵技術：1公斤中草藥+1包本品+1公斤紅糖+20公斤清水混合在非金屬容器中簡單密封發酵72小時以上后使用。每噸飼料中添加10公斤或每噸飲水中添加5公斤。

（七）直接拌料或飲水、制粒飼喂、制作水料

根據不同動物在每噸飼料添加本品2-4包，直接拌料或每包加入1.5-2噸飲水中使用；本產品采用微生物多層包被技術，在每噸3包本品混合飼料中直接制粒，90℃下5分鐘不會影響效果；動物采用水料水料（粥料）的制作：本品1-2包、500公斤全價飼料、1000公斤清水混合后發酵6小時以上后飼喂（預消化的輕度發酵模式），24小時內飼喂完。

廣西助農畜牧科技有限公司有7個專業現代生態養殖技術實戰型團隊，為全國養殖場進行非洲豬瘟防控技術、現代循環生態養殖場的規劃、設計、建設、整改等服務；養殖場環保問題低成本解決方案（養殖場惡臭、氨氣，蒼蠅、污水、糞污資源化、病死動物無害化處理）與專業配套產品。幫助政府部門完成現代生態養殖、糞污資源化、病死動物無害化處理、糧改飼、秸稈綜合利用、牧草產業等達標工作、培訓工作（免費且有專業資料等），針對您當地制定專業方案，做出示范樣板后確定效果再進行推廣。

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廣西助農公司有著20余年的生物發酵飼料經驗，能夠針對你的養殖場做出最適合的模式，我們的發酵技術不僅設施投資簡單（僅需塑料袋或塑料容器等即可），且發酵成功率很高。最關鍵是制作出來的發酵飼料品質比一般更好（得益于先進的酶菌結合發酵劑與經驗總結），能夠為你生產出低成本、養殖環保無抗優質的動物產品出來，大量成功案例可以驗證。提供上門服務（快速解決家禽養殖上的疾病、環保、肉品質等問題）。

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相關鏈接——農業農村部鼓勵企業和研發機構加快生物飼料、酶制劑、益生菌、植物提取物等抗生素替代產品開發，推動全行業抗生素減量替代，確保畜禽產品質量安全