酵母培養物對山羊亞急性瘤胃酸中毒體外發酵模型的調控作用
摘 要：本試驗旨在探究酵母培養物（ＹＣ）對山羊亞急性瘤胃酸中毒外發酵模型的調控作用。采用體外批次培養法，在不同非纖維性碳水化合物（ＮＦＣ）／中性洗滌纖維（ＮＤＦ）［１.１９（常規底物）和２.３０（高ＮＦＣ底物）］的底物中分別添加６個水平［０（對照）、０.５％、１.０％、１.５％、２.０％和２.５％］的ＹＣ，探究其對瘤胃發酵參數的影響，并用多項指標綜合指數（ＭＦＡＥＩ）進行評定，篩選出在不同ＮＦＣ／ＮＤＦ條件下最適ＹＣ添加水平。結果表明：１）在高ＮＦＣ底物條件下，發酵液ｐＨ低于５.８時長超過３ｈ，體外亞急性瘤胃酸中毒模型建立成功；且添加ＹＣ能夠穩定９～１２ｈ的ｐＨ，顯著降低１２和２４ｈ乳酸含量（Ｐ＜０.０５），顯著降低９和１２ｈ氨態氮（NH3-N）含量（Ｐ＜０.０５），顯著提高１２ｈ微生物蛋白（ＭＣＰ）含量（Ｐ＜０.０５），顯著提高３、６、１２、２４ｈ乙酸百分比（Ｐ＜０.０５），顯著提高２４ｈ總揮發性脂肪酸（ＴＶＦＡ）含量（Ｐ＜０.０５）。２）在常規底物條件下，ＹＣ能穩定瘤胃發酵液２４ｈ的ｐＨ，顯著降低１２ｈ乳酸含量（Ｐ＜０.０５），顯著提高９ｈ的NH3-N含量、６和１２ｈＭＣＰ含量及３～２４ｈＴＶＦＡ含量（Ｐ＜０.０５）。３）ＭＦＡＥＩ結果表明，常規底物條件下，以１.５％的ＹＣ添加水平對體外發酵作用效果最佳；高ＮＦＣ底物條件下，以２.０％的ＹＣ添加水平對亞急性瘤胃酸中毒的緩解作用最佳。因此，在高ＮＦＣ底物條件下添加ＹＣ的作用效果更好，能通過降低發酵液中乳酸含量達到調控瘤胃發酵液ｐＨ的效果，具有緩解亞急性瘤胃酸中毒的潛力。
我國優質粗飼料資源缺乏，為滿足生產需要許多養殖者通過在反芻動物飼糧中添加高精料以滿足動物的營養需要，但高精料的過度攝入會導致動物發生亞急性瘤胃酸中毒（ｓｕｂａｃｕｔｅ ｒｕｍｅｎ ａｃｉｄｏｓｉｓ，ＳＡＲＡ）。ＳＡＲＡ的產生不僅給我國反芻動物養殖業帶來了很巨大的損失，而且也是阻礙我國反芻動物發展的主要阻力之一。近年來，許多學者都致力于尋找一種能高效、無副作用緩解瘤胃酸中毒的方法，現有的緩解瘤胃酸中毒癥狀的方法有：添加緩沖劑、接種乳酸利用菌、添加有機酸、添加硫胺素、接種疫苗。這些方法雖在一定程度上能夠緩解瘤胃酸中毒所帶來的經濟損失，但是也均存在一定的弊端，不能從根本上解決瘤胃酸中毒這個問題。酵母培養物（ｙｅａｓｔ ｃｕｌｔｕｒｅ，ＹＣ）作為一種微生物發酵產物添加劑，有望通過調節瘤胃微生物區系的穩定來達到調控瘤胃酸中毒的效果。
ＹＣ是由酵母菌在特定培養基上經過特定的制作工藝發酵而成的一種微生物添加劑，其中富含維生素Ｂ、微量元素、未知營養因子、霉菌吸附劑寡糖、消化酶、氨基酸、有機酸和碳水化合物。近年來，ＹＣ作為一種微生物添加劑已經在反芻動物生產中廣泛應用，能夠改善瘤胃發酵模式和提高動物生產性能。有研究表明，ＹＣ可以通過減少乳酸的產生、增加瘤胃微生物對乳酸的利用量而穩定瘤胃ｐＨ。但也有研究表明，ＹＣ對瘤胃ｐＨ沒有顯著影響，但能夠降低瘤胃內的乳酸含量。ＹＣ對反芻動物作用的效果受菌株種類、飼糧類型、活菌含量等多種因素影響，體內、外試驗結果也不盡相同。因此，本試驗以薩能山羊為試驗動物，通過體外批次培養法，探討在不同非纖維性碳水化合物（ＮＦＣ）／中性洗滌纖維（ＮＤＦ）底物條件下添加不同水平的ＹＣ對由高ＮＦＣ飼糧誘發的ＳＡＲＡ的調控作用，為ＹＣ在山羊生產中的應用提供參考。
1材料與方法
１.１ 試驗動物及飼糧
選取３只體重相近、安裝有永久性瘤胃瘺管的健康薩能山羊作為體外發酵瘤胃液的供體，飼糧組成及營養水平如表１所示。試驗所用ＹＣ是由湖北某酵母股份有限公司提供，經釀酒酵母菌屬發酵而成的，其成分為：酵母活細胞數≥２億個／ｇ，粗蛋白質含量≥２０％，甘露寡糖含量≥１０％，水分含量≤８％。試驗動物每日飼喂２次（０７：００和１９：００），單欄飼養，自由飲水，試驗在揚州大學動物科技學院動物房進行。
１.２ 試驗設計
試驗為單因素試驗設計，在不同ＮＦＣ／ＮＤＦ［１.１９（常規底物）和２.３０（高ＮＦＣ底物）］的底物中分別添加６個水平［０（對照）、０.５％、１.０％、１.５％、２.０％和２.５％］的ＹＣ，采用體外批次培養法探究其對瘤胃發酵參數的影響。
１.３ 瘤胃液的采集
試驗當天于晨飼前進行瘤胃液的采集，采用自制真空負壓裝置采集山羊瘤胃前、中、后３個不同部位的瘤胃液，之后迅速混勻經４層紗布過濾，裝入提前預熱且充滿二氧化碳（CO2）的保溫瓶中迅速帶回實驗室，于３８℃恒溫水浴鍋中保溫，并持續通以CO2。
１.４ 體外發酵液與底物的配制
試驗選用半純合飼糧為發酵底物，底物組成如表２所示；試驗所用人工唾液，參照Ｌｅｅｄｌｅ等的方法配制而成，將配制好的人工唾液放入水浴鍋中水浴至３８℃并持續通入CO2備用。將６０ｍＬ瘤胃液和人工唾液的混合液（瘤胃液∶人工唾液＝１∶２）分裝至厭氧培養瓶中，分裝時向發酵瓶中通５ｓ以上CO2以排除空氣，分裝完畢迅速加蓋異丁基塑膠塞，并以黑色塑料旋擰蓋固定密封，置于３８℃恒溫水浴搖床中進行培養。每個時間點每組設置３個重復，分別于培養后的３、６、９、１２、２４ｈ采集發酵液，用于測定各發酵參數。
１.５ 發酵參數測定方法
發酵液ｐＨ選用ｐＨＳ－３Ｃ型ｐＨ計進行測定；氨態氮（NH3-N）含量參考Ｂｒｏｄｅｒｉｃｋ等的苯酚－次氯酸鈉比色法進行測定；揮發性脂肪酸（ＶＦＡｓ）含量參照Ｋａｗａｍｏｔｏ等和Ｋｈａｎ等的氣相色譜法，用日本津島公司生產的ＧＣ－９Ａ氣相色譜儀進行測定；微生物蛋白（ＭＣＰ）含量參照嘌呤法，用紫外分光光度計進行測定；乳酸含量使用南京建成生物工程研究所Ａ０１９－２乳酸試劑盒測定。
１.６ 數據處理
用ＳＰＳＳ １９.０軟件對數據進行單因素方差分析，并用Ｄｕｎｃａｎ氏法進行多重比較，并應用多項指標綜合指數（ＭＦＡＥＩ）進行評定，Ｐ≤０.０５表示差異顯著。
式中：Ａ１是對照組各個時間點各指標數值；Ａ２分別為０.５％、１.０％、１.５％、２.０％及２.５％組各個時間點各指標數值；Ａ３是在每個時間點Ａ２總和的平均值。ＭＦＡＥＩ為各ＳＦＡＥＩ的加和值。
2結果
2.1 不同ＮＦＣ／ＮＤＦ底物中添加不同水平ＹＣ對瘤胃發酵液ｐＨ的影響
由表３可知，在不同底物發酵條件下發酵液ｐＨ隨著發酵時間的延長而降低。常規底物條件下，發酵３～１２ｈ時，各試驗組發酵液ｐＨ均高于對照組，但差異不顯著（Ｐ＞０.０５）；發酵２４ｈ時，０.５％組、１.０％組和１.５％組發酵液ｐＨ均顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），２.０％組與２.５％組發酵液ｐＨ與對照組相比差異不顯著（Ｐ＞０.０５）。
高ＮＦＣ底物條件下，發酵３和６ｈ時，各試驗組發酵液ｐＨ均高于對照組，但差異不顯著（Ｐ＞０.０５）；發酵９ｈ時，２.０％組與２.５％組發酵液ｐＨ顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），其余各組發酵液ｐＨ雖有所升高，但差異不顯著（Ｐ＞０.０５）；發酵１２ｈ時，２.０％組與２.５％組發酵液ｐＨ顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），１.０％組與１.５％組發酵液ｐＨ顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），０.５％組發酵液ｐＨ與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。發酵２４ｈ時，０.５％組、１.０％組和１.５％組瘤胃發酵液ｐＨ顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），２.０％組和２.５％組與對照組無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。
２.２ 不同ＮＦＣ／ＮＤＦ底物中添加不同水平ＹＣ對瘤胃發酵液NH3-N含量的影響
由表３可知，在不同底物條件下隨著發酵時間的延長，發酵液NH3-N含量均呈現升高的趨勢。常規底物條件下，各組NH3-N含量在發酵１２ｈ時達到最高，在２４ｈ時有所降低。發酵３、６和１２ｈ時，各試驗組NH3-N含量均高于對照組，但差異不顯著（Ｐ＞０.０５）；發酵９ｈ時，１.０％組和１.５％組NH3-N含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），其他各試驗組NH3-N含量雖高于對照組，但差異不顯著（Ｐ＞０.０５）；發酵２４ｈ時，１.５％組NH3-N含量顯著低于其他各組（Ｐ＜０.０５），其他各組間無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。
高ＮＦＣ底物條件下，發酵３ｈ時，添加ＹＣ各組NH3-N含量均高于對照組，其中１.５％組、２.０％組和２.５％組與對照組相比差異顯著（Ｐ＜０.０５），0.５％組和１.０％組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）；發酵６ｈ時，１.０％組的NH3-N含量最低，且顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），其余試驗組與對照組相比均無顯著差異（Ｐ＞０.０５）；發酵９ｈ時，添加ＹＣ各組NH3-N含量均低于對照組，且差異顯著（Ｐ＜０.０５），１.５％組NH3-N含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５）；發酵１２ｈ時，１.５％組NH3-N含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），其余各試驗組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）；發酵２４ｈ時，０.５％組和１.５％組NH3-N含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），其他各組間無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。
２.３ 不同ＮＦＣ／ＮＤＦ底物中添加不同水平ＹＣ對瘤胃發酵液ＭＣＰ含量的影響
由表３可知，在不同底物條件下ＭＣＰ含量隨著發酵時間的延長呈現先升高再降低的趨勢。常規底物條件下，發酵３、９和２４ｈ時，各試驗組ＭＣＰ含量均高于對照組，但差異不顯著（Ｐ＞０.０５）；發酵６ｈ時，１.５％組ＭＣＰ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），其他各試驗組ＭＣＰ含量與對照組相比差異不顯著（Ｐ＞０.０５）；發酵１２ｈ時，添加ＹＣ各組ＭＣＰ含量均高于對照組，其中１.５％組和２.０％組差異顯著（Ｐ＜０.０５），其他各試驗組與對照組之間無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。
高ＮＦＣ底物條件下，發酵３ｈ時，０.５％組、１.０％組和１.５％組ＭＣＰ含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），２.０％組和２.５％組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）；發酵６ｈ時，１.５％組和２.０％組ＭＣＰ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），其余各試驗組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）；發酵９ｈ時，１.５％組ＭＣＰ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），１.０％組和２.５％組ＭＣＰ含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），０.５％組與２.０％組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）；發酵１２ｈ時，添加ＹＣ的各組ＭＣＰ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），其中以１.５％組最高；發酵２４ｈ時，各組間ＭＣＰ含量無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。
２.４ 不同ＮＦＣ／ＮＤＦ底物中添加不同水平ＹＣ對瘤胃發酵液乳酸含量的影響
由表３可知，在不同底物條件下各組乳酸含量均隨著發酵時間的延長而逐漸升高。常規底物條件下，發酵３～９ｈ時，各試驗組乳酸含量均低于對照組，但差異不顯著（Ｐ＞０.０５）；發酵１２ｈ時，添加ＹＣ各組乳酸含量均顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５）；發酵２４ｈ時，１.５％組和２.５％組乳酸含量與對照組相比差異不顯著（Ｐ＞０.０５），１.０％組和２.０％組乳酸含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），０.５％組乳酸含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５）。
高ＮＦＣ底物條件下，發酵３～９ｈ時，各試驗組乳酸含量與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）；發酵１２和２４ｈ時，添加ＹＣ各組乳酸含量均顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），其中發酵１２ｈ時以０.５％組乳酸含量最低，發酵２４ｈ時，以０.５％組和１.５％組乳酸含量最低。
２.５ 不同ＮＦＣ／ＮＤＦ底物中添加不同水平ＹＣ對瘤胃發酵液ＶＦＡｓ含量的影響
由表４可知，發酵液總揮發性脂肪酸（ＴＶＦＡ）含量隨著發酵時間的延長持續升高且發酵各階段ＴＶＦＡ含量均高于對照組。常規底物條件下，發酵３ｈ時，１.５％組和２.５％組丙酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），２.５％組丁酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），０.５％組、１.０％組、２.０％組ＴＶＦＡ含量均顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），１.５％組和２.５％組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）；發酵６ｈ時，０.５％組和１.５％組丁酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），２.０％組ＴＶＦＡ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），其他各試驗組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。發酵９ｈ時，２.０％組丙酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），２.５％組顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），０.５％組、１.５％組、２.０％組和２.５％組丁酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），０.５％組和１.５％組ＴＶＦＡ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），但１.０％組、２.０％組和２.５％組雖有升高的趨勢但差異不顯著（Ｐ＞０.０５）。發酵１２ｈ時，２.０％組和２.５％組丙酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），０.５％組、１.０％組、１.５％組和２.０％組丁酸百分比顯著高與對照組（Ｐ＞０.０５），１.０％組ＴＶＦＡ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），２.５％組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５），０.５％組、１.５％組和２.０％組ＴＶＦＡ含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５）。發酵２４ｈ時，１.５％組和２.０％組丙酸百分比顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５）；２.０％組的丁酸百分比顯著高于其他各組（Ｐ＜０.０５）；２.０％組和２.５％組ＴＶＦＡ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）。發酵３～２４ｈ，各組間乙酸百分比均無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。
高ＮＦＣ底物條件下，發酵３ｈ時，２.０％組和２.５％組乙酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）；０.５％組、１.５％組、２.０％組和２.５％組丙酸百分比顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５）；２.０％組和２.５％組丁酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）；１.５％組ＴＶＦＡ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），２.０％組和２.５％組ＴＶＦＡ含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５）。發酵６ｈ時，２.０％組和２.５％組乙酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）。發酵９ｈ時，２.０％組和２.５％組丁酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）；１.０％組和１.５％組ＴＶＦＡ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）。發酵１２ｈ時，２.０％組和２.５％組乙酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）；２.５％組丙酸百分比顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５）；２.０％組丁酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）；０.５％組、１.５％組和２.０％組ＴＶＦＡ含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），２.５％組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５），１.０％組ＴＶＦＡ含量顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）。發酵２４ｈ時，各組間乙酸百分比無顯著差異（Ｐ＞０.０５），２.０％組丙酸百分比顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５）；０.５％組和１.０％組ＴＶＦＡ含量顯著低于對照組（Ｐ＜０.０５），２.０％組和２.５％組顯著高于對照組（Ｐ＜０.０５），１.５％組與對照組相比無顯著差異（Ｐ＞０.０５）。
２.６ 不同ＹＣ添加水平對瘤胃發酵液參數的綜合評定
由表５知，不同底物條件下添加ＹＣ對個單項發酵指標的影響不同。常規底物條件下，ｐＨ以２.０％組和２.５％組較高；NH3-N含量以１.０％組和２.０％組較高；ＭＣＰ含量以１.５％組和２.５％組較高；ＴＶＦＡ含量以１.５％組和２.５％組較高。高ＮＦＣ底物條件下，ｐＨ以２.０％組和２.５％組較高；NH3-N含量以２.０％組和２.５％組較高；ＭＣＰ含量以１.５％組和２.０％組較高；ＴＶＦＡ含量以２.０％組和２.５％組較高。從體外發酵單項指標無法確定ＹＣ適宜的添加水平，因此，需對各項指標進行綜合評定。在進行不同ＹＣ添加水平瘤胃發酵指標的組合效應綜合評定時，選定不添加ＹＣ組作為參照，依據ＭＦＡＥＩ對ｐＨ及NH3-N、ＭＣＰ和ＴＶＦＡ含量進行綜合評定。常規底物條件下，ＭＦＡＥＩ自高到底的排序為１.５％組＞２.５％組＞２.０％組＞１.０％組＞０.５％組，因此，常規底物條件下，以１.５％的ＹＣ添加水平對體外發酵作用效果最佳。高ＮＦＣ底物條件下，ＭＦＡＥＩ自高到底的排序為２.０％組＞２.５％組＞０.５％組＞１.０％組＞１.５％組，因此，高ＮＦＣ底物條件下以２.０％的ＹＣ添加水平對體外發酵作用效果最佳。
3討論
反芻動物短時間采食過量易發酵碳水化合物，其在瘤胃微生物作用下轉化為大量有機酸（ＶＦＡ和乳酸），導致瘤胃ｐＨ下降，進而引起ＳＡＲＡ。有研究將瘤胃液ｐＨ５.８作為ＳＡＲＡ的診斷依據。瘤胃液ｐＨ的變化主要是受瘤胃液中ＴＶＦＡ和乳酸含量的影響，由于乳酸電離度遠高于一般的ＶＦＡ，因此乳酸對瘤胃ｐＨ的影響更大。本試驗結果表明，常規底物發酵過程中，發酵前１２ｈ發酵液ｐＨ均高于５.８，發酵２４ｈ時，對照組發酵液ｐＨ低于５.８，且添加ＹＣ能夠顯著提高瘤胃發酵液２４ｈ的ｐＨ，這與Ｌｉｌａ等的研究結果不一致，可能是由于所選用ＹＣ的種類不同，且體外條件下發酵過程中所積累的ＶＦＡ和乳酸不能及時的被瘤胃壁代謝吸收而導致２４ｈ的發酵液ｐＨ的降低。高ＮＦＣ底物發酵過程中，對照組發酵９～２４ｈ時，發酵液ｐＨ低于５.８超過３ｈ，這說明體外ＳＡＲＡ模型建立成功。添加ＹＣ能夠顯著提高９～２４ｈ瘤胃發酵液ｐＨ，減少發酵液ｐＨ低于５.８的時間可以維持瘤胃ｐＨ的穩定，這與劉相玉等試驗結果一致。底物中添加ＹＣ能顯著提高ＴＶＦＡ含量，但同一時間點添加不同水平的ＹＣ對ＴＶＦＡ含量的影響并不一致，這可能是由于所添加活菌數不同而導致的，Ｄａｗｓｏｎ等研究表明，活菌含量的多少會影響ＹＣ的作用效果。乳酸作為瘤胃代謝的重要中間產物，其對瘤胃液ｐＨ的影響很大，有研究表明，瘤胃中乳酸的不斷積累會導致乳酸產生菌和乳酸利用菌失衡，進而導致ＳＡＲＡ的發生。乳酸含量的高低在一定程度上反映ＹＣ對ＳＡＲＡ的調控作用效果是否顯著，本試驗結果表明，在高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能夠顯著降低９～２４ｈ時發酵液中乳酸含量，這與劉相玉等研究結果一致，這可能是由于ＹＣ中營養物質能夠促進瘤胃中乳酸利用菌的利用，進而降低發酵液中乳酸含量。在高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能夠顯著提高ＴＶＦＡ含量，降低乳酸含量，穩定瘤胃液ｐＨ，具有緩解ＳＡＲＡ的效果。
反芻動物主要以ＶＦＡ的形勢利用碳水化合物，其中乙酸、丙酸和丁酸占瘤胃內ＴＶＦＡ總量的９５％左右。乙酸是乳脂合成的主要前體，丙酸則是通過糖異生作用合成機體所需的葡萄糖，因此丙酸發酵型可為機體提供更多的能量，有利于提高動物的生產性能和飼料利用率。本試驗中，常規底物條件下，添加ＹＣ對乙酸及丙酸比例無顯著影響，但顯著提高了丁酸比例和ＴＶＦＡ含量；而高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能夠降低乙酸比例，提高丙酸和丁酸比例，提高ＴＶＦＡ含量。這可能是因為在不同ＮＦＣ／ＮＤＦ底物中，ＹＣ對其的作用效果不同，這與丁耿芝研究結果一致，隨著飼糧粗精比的升高，丙酸比例提高而乙酸比例降低。這也說明在高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能夠促進瘤胃發酵類型向丙酸發酵型發展。
NH3-N含量在一定程度上反映了瘤胃微生物對底物含氮物質的利用程度，ＭＣＰ主要是反映瘤胃微生物對發酵液中氮源的利用情況，其為動物機體提供蛋白質需要量的７０％～８０％。在體外試驗中ＹＣ對NH3-N含量的影響作用存在爭議，但有研究表明，添加ＹＣ能提高瘤胃液中ＭＣＰ含量。高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能顯著提高發酵３ｈ瘤胃液的NH3-N含量，顯著降低發酵６～２４ｈ瘤胃液的NH3-N含量，這可能是由于本試驗所選底物為半純合底物，其在體外發酵剛開始時被瘤胃微生物快速利用而導致瘤胃發酵液在發酵３ｈ時NH3-N含量升高，在發酵進行的６～２４ｈ中ＹＣ能夠促進瘤胃微生物對NH3-N的利用，進而導致發酵液中NH3-N含量降低，這與劉相玉等的研究結果一致。有研究表明，高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能夠促進NH3-N的吸收和轉化，進而降低瘤胃發酵液中NH3-N含量，提高ＭＣＰ的含量。本試驗中，高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能夠顯著降低發酵３ｈ瘤胃液中ＭＣＰ含量，顯著提高發酵６～１２ｈ瘤胃液的ＭＣＰ含量，這與NH3-N含量的變化趨勢一致，這說明在高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能夠促進瘤胃微生物的生長。
因此，在高ＮＦＣ底物條件下模擬ＳＡＲＡ，添加ＹＣ能夠通過降低發酵液中乳酸含量達到調控瘤胃發酵液ｐＨ的效果，促進瘤胃微生物對氨氮的利用于瘤胃微生物的生長，具有緩解ＳＡＲＡ的潛力。但大量研究表明，ＹＣ在體內外對瘤胃發酵指標的影響作用具有一定差異，且ＹＣ的作用效果受多種因素（酵母菌種類、活性、添加劑量、飼糧種類）的影響。因此，未來需通過體內試驗進一步來驗證ＹＣ對ＳＡＲＡ的緩解作用，還需應用現代科技手段篩選出更高效持久的緩解ＳＡＲＡ的酵母產品。
4結論
①當ＮＦＣ／ＮＤＦ為２.３０時，可成功建立體外ＳＡＲＡ模型。
②在高ＮＦＣ底物條件下，添加ＹＣ能夠穩定瘤胃液ｐＨ，提高ＴＶＦＡ含量，降低乳酸含量，具有緩解ＳＡＲＡ的潛力，其中以添加底物干重的２.０％的ＹＣ對ＳＡＲＡ的緩解作用最佳。
③添加ＹＣ對常規底物的作用效果不明顯，以添加底物干重的１.５％的ＹＣ的改善作用效果最佳。
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