日本AAAA级毛卡片免费观看_亚洲视频91_一级少妇黄色片_91成人?合_内射视频←WWW夜_91久色视频

生態養殖熱線和微信13277883322

3種添加劑對花鱸消化酶活力、前腸組織結構及營養物質表觀消化率的影響

2020-08-27 14:17:24      點擊:

摘要:本試驗旨在研究飼料中添加復合核苷酸、植酸酶或復合芽孢桿菌對花鱸消化酶活力、前腸組織結構及營養物質表觀消化率的影響。選?。常玻拔渤跏俭w質量為(13.50±0.09)g的花鱸幼魚,隨機分成4組,每組4個重復,每個重復20尾。對照組(G0組)飼喂基礎飼料,3個試驗組分別飼喂在基礎飼料中添加0.06%復合核苷酸(G1組)、0.04%植酸酶(G2組)、0.10%復合芽孢桿菌(G3組)的試驗飼料。飼養周期為56d。結果顯示:各試驗組前腸、肝臟和胃的蛋白酶活力與G0相比無顯著差異(P>0.05)。G2組的肝臟淀粉酶活力顯著高于G0組(P<0.05);G1組的前腸脂肪酶活力顯著低于G0組(P<0.05);各組間前腸和胃淀粉酶、肝臟和胃脂肪酶活力差異不顯著(P>0.05)。飼料中添加3種添加劑均能顯著增加前腸肌層厚度和絨毛高度(P<0.05),增加固有層和上皮細胞間的緊密度,其中以植酸酶效果最為顯著。與G0組相比,G1組的干物質表觀消化率顯著升高(P<0.05);粗蛋白質、粗脂肪和總能表觀消化率各組間差異不顯著(P>0.05)。與G0組相比,G1和G3組粗灰分表觀消化率顯著升高(P<0.05),G2組粗灰分表觀消化率則顯著降低(P<0.05)。由此可見,飼料中添加植酸酶能顯著提高花鱸肝臟淀粉酶活力和干物質表觀消化率,顯著降低粗灰分表觀消化率;飼料中添加復合核苷酸能顯著降低花鱸前腸脂肪酶活力,顯著提高粗灰分表觀消化率;此外,飼料中添加復合核苷酸、植酸酶或復合芽孢桿菌均能改善花鱸前腸組織結構。

在飼料工業中,尤其是水產飼料中,節約魚粉是亟待解決的重要問題。我國是農業大國,可作為水產飼料的植物蛋白質源的品種眾多,來源廣泛,價格低廉。隨著魚粉資源日益枯竭以及魚粉價格的不斷升高,植物蛋白質作為魚粉替代源越來越受到人們的重視,高水平植物蛋白質或無魚粉飼料將是未來的發展趨勢。而對于肉食性魚類來說,飼料中過高水平的植物蛋白質飼料會導致魚體代謝紊亂,進而產生脂肪肝等營養代謝性疾病,影響其生長性能甚至導致死亡。研究認為,這種主要與植物蛋白質含有抗營養因子、適口性差等有關,從而限制了植物蛋白質在水產飼料中的利用量。但有研究發現,可通過在水產動物飼料中添加如外源酶制劑、核苷酸、益生菌等添加劑來改善植物蛋白質的應用效果?! ?/span>

本團隊前期開展了花鱸(Lateolabrax japonicus)對豆粕、花生粕、棉籽粕、菜籽粕和玉米干酒糟及其可溶物(DDGS)5種植物蛋白質源營養物質表觀消化率的影響研究,結果發現,花鱸對豆粕和花生粕的營養物質表觀消化率與魚粉比較接近;當等氮替代16%魚粉(基礎飼料含40%魚粉)時,豆粕效果最好,其次是花生粕。為提高豆粕和花生粕在花鱸飼料中的利用率,本試驗以28%魚粉、30%豆粕和15%花生粕為主要蛋白質源配制基礎飼料,并分別添加復合核苷酸、植酸酶、復合芽孢桿菌3種添加劑,研究其對花鱸消化酶活力、前腸組織結構及營養物質表觀消化率的影響,旨在為提高植物蛋白質源在花鱸飼料中的應用提供有效途徑,并為花鱸實用飼料的配制提供參考。

1材料與方法

1.1 試驗材料  

晶體賴氨酸純度為78.8%,晶體蛋氨酸純度為99%,由廣州某生物科技有限公司提供;植酸酶活力為2500U/g,由廣東某生物科技有限公司提供;復合核苷酸中腺苷酸二鈉(AMPNa2)∶鳥苷酸二鈉(GMPNa2)∶胞苷酸二鈉(CMPNa2)∶尿苷酸二鈉(UMPNa2)=1∶1∶1∶1,由南京某生物技術有限責任公司提供;復合芽孢桿菌(枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌)中益生菌數量為5×109CFU/g,由湛江某飼料有限公司提供。

1.2 試驗設計與飼料組成  

以魚粉、豆粕和花生粕為主要蛋白質源,以魚油和豆油為主要脂肪源配制含有28%魚粉、30%豆粕和15%花生粕的基礎飼料,其組成及營養水平見表1。在基礎飼料中分別添加0.06%復合核苷酸、0.04%植酸酶、0.10%復合芽孢桿菌配制3種試驗飼料。各飼糧中均添加0.04%三氧化二釔(Y2O3)作為指示劑。飼料原料經粉碎后過60目篩,Y2O3、維生素和礦物質等微量成分按逐級擴大法混勻,然后加入魚油、豆油、水混勻,用SLX-80型雙螺桿擠壓機制成直徑為2.5mm的顆粒,50℃烘7~8h,自然冷卻后裝入密封袋,置于-20℃冰箱中保存備用。

1598509082956252.jpg

1.3 試驗魚和飼養管理  

花鱸幼魚購自福建詔安縣英港育苗場。試驗前暫養在室外水泥池,每天飽食投喂商品料2次,暫養4周。選取體質量為(13.50±0.09)g的花鱸幼魚320尾,隨機分為4組,每組4個重復,每個重復20尾魚。飼養試驗在廣東省農業科學院動物科學研究所室內循環水養殖系統進行,對照組(G0組)飼喂基礎飼料,3個試驗組分別飼喂在基礎飼料中添加0.06%復合核苷酸(G1組)、0.04%植酸酶(G2組)、0.10%復合芽孢桿菌(G3組)的試驗飼料。養殖系統是由16個直徑為80cm、高為70cm、容積為350L(水體容積為300L)的玻璃纖維桶構成。養殖水源為經過活性炭、珊瑚石過濾后的自來水,流水速率設置為4~5L/min,養殖過程中24h連續充氧曝氣,每天分別在09:00和18:00投喂飼料,采用表觀飽食投喂法,同時根據攝食情況及時調整投飼量。每周換水2次,每次換水量為1/3。飼養期間水溫為27.5~32.5℃,溶氧濃度>6.0mg/L,pH7.3~7.6,氨氮濃度<0.10mg/L,亞硝酸鹽濃度<0.03mg/L,自然光源。飼養周期為56d。

1.4 樣品采集  

待飼養試驗結束時,禁食24h,然后每桶隨機選?。滴不|置于冰盤內解剖,取出胃、腸道和肝臟,用4℃預冷的生理鹽水進行沖洗,用吸水紙吸干表面,-80℃冰箱保存。每桶另隨機選?。澄不|置于冰盤內解剖,取出1cm前腸(根據前中腸結點確定),固定在福爾馬林溶液內?! ?/span>

采樣結束后,各桶剩余的魚恢復正常投喂,暫養1周適應環境。每天投喂2次,每次投喂1h后用虹吸法除殘餌和糞便,之后2h撈網收集長條狀包膜完整的糞便,50℃烘干后-20℃冰箱中保存備用。連續收集糞便30d。

1.5 消化酶活力  

從-80℃冰箱中取出胃、腸道和肝臟樣品,以1∶9的比例加入預冷生理鹽水勻漿,配制成10%的組織勻漿液,離心后取上清液作為待測酶液。采用福林-酚法測定蛋白酶活力,采用碘-淀粉比色法測定淀粉酶活力,使用脂肪酶測定試劑盒(南京建成生物工程研究所產品)測定脂肪酶活力。

1.6 腸道組織切片  

取福爾馬林固定24h的前腸樣品,按照乙醇梯度脫水、二甲苯透明組織塊、包埋、切片、脫蠟、染色、分化、切片脫水復染、封片步驟制作組織切片,用光學顯微鏡掃描前腸組織,觀察并記錄相關特性。

1.7 營養物質表觀消化率  

飼料和糞便的水分含量采用105℃烘箱干燥法(GB/T 6435—2014)測定;粗蛋白質含量采用凱氏定氮法(GB/T 6432—1994)測定;粗脂肪含量采用(GB/T 6433—2006)索氏抽提法測定;粗灰分含量采用550℃灼燒法(GB/T 6438—2008)測定;總能采用氧彈熱量計(IKA-C2000)測定。飼料和糞便中Y2O3含量委托廣州分析測試中心采用等離子體光譜儀(SPECTRO CIOSCCD)測定?! ?/span>

營養物質表觀消化率的計算公式如下:

飼料干物質表觀消化率(%)=100×[1-飼料中Y2O3含量(%)/糞便中Y2O3含量(%)];

飼料某營養物質表觀消化率(%)=100×{1-[飼料中Y2O3含量(%)/糞便中Y2O3含量(%)]×[糞便中該營養物質含量(%)/飼料中該營養物質含量(%)]}。

1.8 數據統計  

試驗數據用SPSS 17.0軟件進行單因素方差分析(one⁃way ANOVA),結果采用平均值±標準差表示,若組間差異顯著,則使用Duncan氏法進行多重比較,以P<0.05為差異顯著標準。

2結果

2.1 消化酶活力

由表2可知,與G0組相比,各試驗組前腸、肝臟和胃的蛋白酶活力無顯著差異(P>0.05)。G1組前腸脂肪酶活力顯著低于G0組(P<0.05),其他試驗組與G0組無顯著差異(P>0.05)。肝臟和胃脂肪酶活力在各組間無顯著差異(P>0.05)。與G0組相比,各試驗組肝臟淀粉酶活力呈上升趨勢,其中G3組與G0組的差異達到顯著水平(P<0.05)。各試驗組前腸和胃淀粉酶活力與G0組相比無顯著差異(P>0.05)。

1598509144319295.jpg

2.2 前腸肌層厚度和絨毛高度  

由表3可知,飼料中添加3種添加劑均能顯著提高花鱸前腸肌層厚度和絨毛高度(P<0.05),以添加植酸酶時效果最顯著。

1598509194196655.jpg

2.3 前腸組織切片  

如圖1所示,G0組前腸肌肉層較薄,固有結締組織不緊密,腸道內絨毛脫落較多,部分上皮細胞與固有層分離;G1組前腸腸道內褶皺明顯增多,絨毛上杯狀細胞排列緊密;G2組前腸腸道結構完整,無損傷,褶皺布滿腸腔,肌肉層明顯變厚;G3組前腸肌肉層明顯變厚,腸道結構完整無損傷,褶皺排列較為緊密,絨毛上杯狀細胞排列緊密。

1598509240142177.jpg

圖 1  3 種添加劑對花鱸前腸組織形態的影響(蘇木精-伊紅染色)

2.4 營養物質的表觀消化率  

由表4可知,G2組的干物質表觀消化率最高,顯著高于G0和G1組(P<0.05),與G3組無顯著差異(P>0.05)。粗蛋白質、粗脂肪和總能表觀消化率各組間無顯著差異(P>0.05)。與G0組相比,G1和G3組粗灰分表觀消化率顯著升高(P<0.05),G2組粗灰分表觀消化率則顯著降低(P<0.05)。

1598509283125196.jpg 

3討論

3.1?。撤N添加劑對花鱸消化酶活力的影響  

消化酶活力是評價水產動物生理消化機能的重要指標,其高低養殖品種、養殖規格、水體環境、飼料、養殖模式、飼養方法等有關。外源核苷酸可顯著提高異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)幼魚肝胰臟蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力。飼料中添加混合核苷酸能顯著提高羅非魚(Oreochromis niloticus)腸道蛋白酶和淀粉酶活力,對腸道脂肪酶和肝胰臟蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力的影響不顯著。在本試驗中,復合核苷酸能顯著降低花鱸前腸脂肪酶活力,對其他消化酶活力的影響不顯著。豆粕中的胰蛋白酶抑制因子是引起消化道蛋白酶活力下降的重要因素。本試驗飼料中添加了30%的豆粕,是否是造成花鱸脂肪酶活力下降的原因呢?關于核苷酸對脂代謝影響的作用機理的研究還比較缺乏,其具體機制并不明確,有待進一步研究。

  本試驗結果顯示,飼料中添加植酸酶能顯著提高花鱸肝臟淀粉酶活力,對前腸、胃淀粉酶和肝臟脂肪酶活力無顯著影響。植酸酶在水解植物蛋白質中的植酸時,促進了營養物質的充分釋放,刺激機體內源消化酶的分泌,進而提高魚體消化酶活力。有研究發現,隨著植酸酶添加量的增加,異育銀鯽的肝胰臟淀粉酶活力表現出上升的趨勢。但是關于植酸酶對魚類消化酶活力的影響有不同的報道。飼料中添加1000U/kg植酸酶顯著提高了黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)胃、腸道蛋白酶和胃淀粉酶活力。飼料中添加500、1000或1500U/kg植酸酶均能顯著提高異育銀鯽肝胰臟蛋白酶和脂肪酶、腸道脂肪酶活力,顯著降低肝胰臟淀粉酶活力。在大菱鲆(Scophthalmus maximusL.)幼魚飼料中添加1000或2000U/kg植酸酶均顯著提高了胃和腸道蛋白酶活力。在不含磷酸二氫鈣的基礎飼料中添加500、1000或1500U/kg植酸酶均顯著提高了紅鰭東方鲀(Takifugu rubripes)幼魚的腸道脂肪酶和淀粉酶活力。添加1g/kg植酸酶(2500FYT/g)顯著提高了奧尼羅非魚(Oreochromis niloticus×O. aureus)肝胰臟和腸道淀粉酶活力,而對腸道脂肪酶活力無顯著影響。植酸酶顯著提高鱸魚胃腸蛋白酶活力,對胃腸淀粉酶和脂肪酶活力無顯著影響。出現不同試驗結果的原因可能與酶的種類、用量,魚的品種、大小,飼料配方以及養殖環境不同有關。魚類各種消化器官都存在淀粉酶,而淀粉酶的分布與魚的種類有關。

芽孢桿菌具有較強的產酶特性。芽孢桿菌作為水產動物的益生菌,在飼料中添加后在消化道中分泌多種消化酶,促進營養物質消化。芽孢桿菌對水產動物消化酶活力的影響不盡一致。在低魚粉條件下,適量的枯草芽孢桿菌可顯著提高珍珠龍膽石斑魚(Epinephelus lanceolatu♂×Epinephelus fuscoguttatus♀)腸道蛋白酶和淀粉酶活力。在飼料中添加200或300mg/kg地衣芽孢桿菌均顯著提高異育銀鯽食糜蛋白酶和淀粉酶及腸道蛋白酶活力;添加400mg/kg地衣芽孢桿菌也顯著提高了食糜淀粉酶和腸道蛋白酶活力;添加地衣芽孢桿菌對肝胰臟蛋白酶活力無顯著影響,但是顯著降低了肝胰臟淀粉酶活力。飼料中添加蠟樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌顯著降低了草魚(Ctenopharyngodon idella)腸道蛋白酶活力,并顯著提高了腸道淀粉酶活力。本試驗中,飼料中添加復合芽孢桿菌對花鱸前腸、胃和肝臟蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力的影響不顯著。這可能與本試驗選用的是枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌復合芽孢桿菌有關,不同芽孢桿菌的作用機制有所差異,再者芽孢桿菌對動物消化酶活力的影響可能受到養殖動物品種、養殖環境、飼養管理方法及芽孢桿菌添加量的影響。

3.2 3種添加劑對花鱸前腸組織結構的影響  

腸道是消化吸收最主要的器官,是動物快速生長和健康的重要保障,腸道黏膜層形態結構是腸道的基礎結構,腸道肌肉層厚度、腸道褶皺高度和厚度增加能增強動物的消化吸收能力。一般認為,當腸道出現上皮細胞脫落、絨毛脫落、肌肉層變薄等病變時,動物的消化吸收能力會顯著降低。前腸黏膜皺褶的高低與魚類食性有一定關系,前腸的組織結構能一定程度反映魚類的消化吸收能力。本試驗結果顯示,飼料中添加復合核苷酸、植酸酶和復合芽孢桿菌能顯著增加花鱸前腸肌層厚度和絨毛高度。這與前人的研究結果類似。研究發現,飼料中補充外源核苷酸能夠提高大黃魚(Pseudosciaena crocea R.)、凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)的腸道肌肉層(腸壁)厚度和腸道褶皺;飼料中添加復合酶制劑能夠降低鯔魚腸道病變的幾率,改善腸道健康;飼料中添加復合酶制劑(主要為植酸酶和碳水化合物酶)可顯著增加草魚腸道絨毛高度和縱截面面積;飼料中添加鼠李糖乳桿菌可以改善尼羅羅非魚腸道形態結構;飼料中添加芽孢桿菌能增加虎龍斑(E.fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)腸絨毛高度。

3.3?。撤N添加劑對花鱸營養物質表觀消化率的影響  

在真鯛(Pagrus major)幼魚飼料中添加0.2%腺苷酸(AMP)能提高生長性能、攝食率、飼料轉化率和蛋白質效率,改善干物質、粗蛋白質和粗脂肪的表觀消化率,其中干物質表觀消化率顯著高于對照組。在豆粕和花生粕部分替代魚粉飼料中添加復合核苷酸能顯著提高凡納濱對蝦對飼料干物質和粗蛋白質、粗脂肪和磷的表觀消化率。飼料中添加復合核苷酸改善了凡納濱對蝦對飼料營養物質的表觀消化率,與核苷酸的促攝食、為營養物質合成提供關鍵輔酶、提高消化酶轉運基因表達量等作用有關。而本試驗結果顯示,飼料中添加復合核苷酸能顯著提高花鱸的粗灰分表觀消化率,對其他營養物質表觀消化率無顯著影響。有關水產動物對飼料中粗灰分表觀消化率產生影響的機理研究較缺乏,有待進一步研究?!?/span>

在豆粕和花生粕部分替代魚粉飼料中添加植酸酶能顯著提高凡納濱對蝦對飼料干物質、粗蛋白質、粗脂肪和磷的表觀消化率;飼料中添加植酸酶能顯著提高黃顙魚對飼料干物質、粗蛋白質、總能、粗灰分和磷的表觀消化率,對粗脂肪表觀消化率的影響不顯著。低磷低脂飼料和無魚粉低磷低脂飼料中添加復合酶制劑可以顯著提高草魚干物質、粗蛋白質和磷表觀消化率。本試驗結果顯示,低魚粉飼料中添加植酸酶顯著提高了花鱸干物質表觀消化率,對粗蛋白質、粗脂肪和總能表觀消化率的影響不顯著。通常認為,酶制劑可以通過改變微生物組成影響營養物質的消化吸收,最終改善養殖動物的生長性能。羅非魚飼料中補充復合酶制劑(植酸酶為主)能改善腸道微生物組成,進而影響其腸道形態。植酸酶可能是通過調節食糜的物理化學性狀以及腸道微生物所需營養物質的量,同時提高具有潛在益生效應物質的含量,從而影響腸道微生態的發育,進而影響營養物質的消化吸收。本試驗也發現植酸酶能夠顯著提高花鱸的干物質表觀消化率,推測是由于植酸酶可解除植酸與一些內源性酶的結合,釋放了部分消化酶,進而提高了對飼料營養物質的消化率。關于水產動物對飼料中粗灰分表觀消化率影響的研究較少,本試驗結果顯示飼料中添加植酸酶能顯著降低花鱸的粗灰分表觀消化率,其作用機制需作進一步分析。  

復合芽孢桿菌對花鱸營養物質表觀消化率的作用效果與復合核苷酸的類似,各營養物質的表觀消化率較對照組均有提高,其中粗灰分表觀消化率顯著提高。芽孢桿菌可顯著提高奧尼羅非魚、斑節對蝦(Penaeus monodon)飼料中營養物質的表觀消化率。這可能有2個方面的原因:一方面,芽孢桿菌在宿主消化道內定植、代謝過程中,可以產生一些消化酶等物質,促進機體的消化系統對營養物質包括礦物質等的消化吸收,提高相關營養物質的表觀消化率;另一方面,芽孢桿菌可促進魚體腸道的生長發育,提高腸壁厚度、腸黏膜高度等,使腸道吸收有效面積增大,進而提高對營養物質的表觀消化率。但是關于芽孢桿菌對飼料中粗灰分表觀消化率影響的作用機制,尚需作進一步的研究。

4結論

飼料中添加植酸酶能顯著提高花鱸肝臟淀粉酶活力和干物質表觀消化率,顯著降低粗灰分表觀消化率;飼料中添加復合核苷酸顯著降低花鱸腸道脂肪酶活力,顯著提高粗灰分表觀表消化率;此外,飼料中添加復合核苷酸、植酸酶或復合芽孢桿菌均能改善花鱸腸道組織結構。

酶+菌融合預消化技術典型代表產品——養豬專用復合益生菌——規模養豬低成本生態健康養殖更好更專業復合益生微生物制劑產品,可以高溫制粒、直接加入飼料中、飲水中添加

相關鏈接:酶+菌融合預消化技術典型代表產品——養豬專用復合益生菌——規模養豬低成本生態健康養殖更好更專業復合益生微生物制劑產品,可以高溫制粒、直接加入飼料中、飲水中添加

【視頻】原聲不使用養豬專用復合益生菌與使用豬場的區別

相關鏈接——

①.99多功能飼料發酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態飼料發酵劑,更輕易成功、效果更好的生物飼料發酵劑,簡單好用的中草藥發酵劑 

.99多功能飼料發酵劑,酶菌結合飼料發酵劑中的佼佼者,幾項數據對比讓你信服

③.【視頻】部分發酵飼料養豬雞鴨帶給你無臭味健康無抗養殖效果

④.【視頻】發酵豆渣養豬新技術

⑤.御瘟湯——防控非洲豬瘟增加自制發酵中草藥體內外運用的原生中草藥配方

⑥.動物促生長增肥原生中草藥組方——效果直觀可見,生長速度提高顯著,降低料耗提前出欄

⑦.“土味十足”原生中草藥配方——效果顯著的動物肉蛋品質改良中草藥配方,比放養更土味十足

⑧.效果極佳的“多功能增強型雙黃連散”原生中草藥組方 

⑨.一種快速促進豬雞鴨快速生長增重的中草藥配方和運用方法

10.豬場復產成功案例,防控非洲豬瘟運用自制發酵中草藥更易成功,不需大設施投入成本低廉

11.創業養殖場先種好牧草,享受政策和降低養殖風險路更寬

12.2020年多年生禾本科高產牧草品種推薦,亞熱帶與大棚內可四季產出,提供專業種植、加工、利用、形成生態循環一條龍服務

13.養殖場廢水(污水)最簡單的快速處理技術,達標農灌水或者變成無臭味不燒苗的液態有機肥技術

14.新建豬場用哪種模式好?新型水泡糞技術模式節約30%以上建設成本與減少70%以上糞污處理環保建設

15.豬場復養如何才能成功?推薦自制發酵中草藥組合拳模式!數百成功案例歡迎驗證

16.豬場發現疑似感染非洲豬瘟后如何快速控制下來(20余天達到滿意效果,有大量成功案例)

17.養殖場托管找廣西助農公司,無專業技術員也能夠高效益生產,總有一種模式適合你

18.養殖場環保與糞污資源化利用找廣西助農公司,聯系我們

微生物知識微生物專業知識微生物試驗報告與運用益生菌與人體健康
關閉
關閉
加微信好友咨詢
技術QQ客服
點擊這里給我發消息
淘寶旺旺客服
微信公眾號和客服
主站蜘蛛池模板: 日韩欧美国产精品_巴中文旅集团_粉嫩蜜桃麻豆免费大片_久久久精品久久日韩一区_久久久久久久久久爱_男女爽爽午夜18污污影院_亚州欧美精品_婷婷久久香蕉五月综合加勒比 | 女仆乖乖脱内衣内裤打屁股_正在播放91精_少妇自慰浓密的p毛_亚洲热一区_xxxx69成人在线观看_亚洲A∨国产AV综合AV_精品综合在线_奇米成人网 | 99riav国产一区二区三区_婷婷综合久久一区二区三区_天天干91_日韩欧美在线观看一区二区三区_中文字幕亚洲一区_99视频精品全部免费免费观看_久久精品国产亚洲AV网站_粗长巨龙挤进新婚少妇 | 国产乱了_日韩欧美xxxxx_国产精品成人扳一级aa毛片_韩国一级无码免费精品视频_老师办公室被吃奶好爽在线观看_日本3级视频_啦啦啦中文在线观看日本_奇米影视7777久久精品人人爽 | av一二三区_欧美成人午夜免费影院手机在线看_粉嫩av免费一区二区三区_日本三极片_国产目拍亚洲精品一区二区_CHINESE极品人妻VIDEOS_中文字幕人成无码人妻_北条麻妃最猛aⅴ作品 | 天堂网中文_国产丰满乱子伦无码专_91插插插影_国产精品乱码高清在线观看_国内av免费看_精品无码免费专区毛片_国产露脸无码a区久久蘑菇_国产美女二区 | 日韩欧美在线视频播放_日韩的一区二区_亚洲综合AV在线在线播放_久久久精品三级_大地资源网高清免费观看_wwwav国产_成人av免费网址_边摸边吃奶边做爽动态 | 第一福利导航导航_国产激情久久久久久熟女老人AV_丁香五月七月综合激情_久草毛片_91亚色视频在线观看_日本女优一区_日日躁夜夜躁狠狠躁av麻豆_国产精品乱码久久久久久久久 | 日韩免费无码专区精品观看_久久久久久久久久久久久久免费看_18av千部免费影片与您_日本天堂在线视频_空姐毛片_香蕉私人影院_黑人巨茎大战白人美女_国产成人av免费观看 | 国产高清av免费观看_久久一区二区三区欧美_国产一区二区三区久久久久久_婷婷成人综合网_成人插入视频_成人做爰视频WWW免费看网站_欧美69视频_少妇AB又爽又紧无码网站 | 美女一二三区_香港日本三级在线播放_国产性―交一乱―色―情人_免费伦费一区二区三区四区_欧美亅性猛交内射_8mav在线_无遮挡边吃摸边吃奶边做_美女扒开屁股让男人桶 | 国产高清免费在线_国产美女久久久久_毛片在线不卡_亚洲在线一区二区_超碰免费视_24小时日本在线视频_国产啪视频1000部免费_精品国产一区二区三区四区阿崩 | 成人在线观看地址_国产成人AV永久免费观看網站信息!_久久综合久久伊人_久久亚洲一区二区三_91短视频版在线观看高清_免费九九视频_性满足bbwbbwbbw_午夜精品在线免费观看 | 超碰在线97中文字幕_天天草夜夜草_亚洲精品久久久久久久久久久久_四韩色情无码一区二区三区_国产精品久久久久久久7777_欧美国产日韩在线三区_7777偷窥盗摄视频_97在线视频免费 | 日韩美a一级毛片国产_91视频官网_JAPAN少妇洗澡VIDEOS_黄色一级视频在线观看_天天干天天操天天搞_亚洲成a人蜜臀av在线播放_777奇米888色狠狠俺也去_99久久精品毛片免费播放高清 | 好黄好污美女裸体网站_久久久久久a亚洲欧洲aⅴ96_都市激情在线亚洲国产_黄色片s色_超碰青草_大屁股大乳丰满人妻_秋霞午夜鲁丝一区二区老狼_性新婚a大黄毛片 | A天堂最新版在线中文_亚洲永久免费视频_精品一区二区三人妻视频_丁香五月网久久综合_网站一级片_男人用嘴添女人私密视频软件_久久不射国产精品_国产精品久久久久99 | 中文字幕亚洲不卡_久精品视频在线_永久免费无码a片在线观看_精品国产福利一区二区三区_中国1级黄色片_久久激情影院_乱码久久_精品久久麻豆 | A天堂最新版在线中文_亚洲永久免费视频_精品一区二区三人妻视频_丁香五月网久久综合_网站一级片_男人用嘴添女人私密视频软件_久久不射国产精品_国产精品久久久久99 | 性迷宫法国_九色porny丨首页在线_中文字幕观看_俺来也官网欧美久久精品_www久久精品_欧美激情爱爱_成人免费一区二区_99精品国产福久久久久久 | 国产精品18久久久久久av小说_91高清一区_好男人资源在线www免费_久久久噜噜噜久久中文福利_日本中文字幕一级_99精品视频免费观看_免费看片源_亚洲精品国男人在线视频 | 国产村民一二三区_国产香蕉尹人综合在线观看_久久久久久久久久一区_久久婷婷人人澡人人喊人人爽_天天干天天透_日韩免费特黄一二三区_欧美国产日韩在线视频_国产欧美日韩另类在线专区 | 亚洲免费看看_91日韩精品久久久久身材苗条_999久久久精品_拔插拔插影院_日本免费新一区视频_国产一区二区三区四区三区_91精品久久久久久久浪潮_亚洲色大成网站WWW永久网 | 中文一区一区三区免费在线观看_日本伊人色综合网_最近更新中文字幕在线2018二_黄色片免费在线_色婷婷香蕉在线一区二区_国产女性无套免费网站_边啃奶头边躁高h裴钰莫捷_国产一级淫片s片sss毛片s级 | 国产精品久久影院_免费A级毛片黄A片高清在线播放_亚洲大片在线_久久99热婷婷精品一区_国产精品亚洲swag_91久一久精品日日躁夜夜躁国产_午夜dj视频免费观看www_欧美区精品系列在线观看不卡 | 91久久久久久亚洲精品禁果_午夜福利123_国产一二区免费视频_国产99久久久久久免费看农村_国产成人精品国内自产拍_91在线看看_日韩免费观看视频_熟妇人妻AV无码一区二区三区 | 中文字幕二三区不卡_国产午夜人做人免费视频_午夜男女爽爽影院a片免费_日本爽快片视频_亚洲美日韩_狠狠躁夜夜躁AV网站中文字幕_夜夜精品无码一区二区三区_在线国产小视频 | 奇米在线免费视频_日日草影院_日日噜噜夜夜狠狠va视频v_av在线免费观看不卡_一本加勒比HEZYO无码资源网_蜜桃视频在线观看www_午夜综合_国产情侣自拍小视频 | 中文人字幕第三页_无码纯肉视频在线观看_99re国产在线播放_日本欧美高清全视频_日韩七区_亚洲第一最快AV网站_中日韩欧美风情视频_欧美成人一区二 | 国产三区在线播放_色久综合_亚洲一区二区欧美_阿v片在线视_久久免费在线视频_中文人妻熟女乱又乱精品_好看的日韩精品视频在线_57pao成人国产永久免费视频 | 年轻的秘书在线观看_国产又粗又大又黄_国产精品小视频网站_极品美女无套啪啪_精品久久久久久国产牛牛_无码中文字幕AⅤ精品影院_天天操天天玩_少妇大叫太大太粗太爽了A片软件 | 欧美丰满少妇XXXXX_爱爱网站免费_成在人线AV无码免费看_亚洲三级在线_午夜影院色_无码视频一区二区三区在线观看_曰本女人牲交全过程免费观看_wwwwxxxx亚洲 | 9热视频_一区免费在线_亚洲国产AV无码专区亚洲AV_免费日本中文字幕_99人人澡_国产精品九色_国产欧美在线观看免费_亚洲欧美日韩国产国产A | 嫩草精品_91精品一区二区三区四区_欧洲美女粗暴牲交_日韩精品无码一区二区三区av_伊人青草_内射爽无广熟女亚洲_欧美黄片免费看_久久本道综合色狠狠五月 | 都市激情91_天堂av2021_亚洲va韩国va欧美va精四季_亚洲一二区三区_婷婷六月综合缴情在线_亚洲成av人片在线观看www_国严精品久久久久久亚洲影视_99久久久无码国产精品性黑人 | 91精品国产91久久综合_av无码专区亚洲av毛片_亚洲a区视频_国产一区播放_综合图区亚洲_国产aⅴ无码久久丝袜美腿_双乳奶水饱满少妇呻吟_四虎网址在线 | 亚洲日韩国产成网在线观看_69久久久_伊人久久精品无码麻豆一区_亚洲欧美日韩在线观看a三区_日本网站在线_av在线免费观看国产_最近免费中文字幕大全高清MV_性欧美长视频免费观看不卡 | 一区二区播放_国产ts人妖一区二区三区_日韩精品在_国产在线播放一区_又大又黄又硬视频_激情久久一区_好姑娘国语免费高清观看_国产在线成人 | 日本aaaaaa_久久看人人爽人人_日日碰狠狠躁久久躁9_免费无码中文字幕a级毛片hd_成人羞羞国产免费动态_欧美另类videos极品hd_日本人配人免费视频人_99久久日韩精品视频免费在线观看 | 中国久久久_动漫AV网站免费观看_av大西瓜_久草久视频_国产精品男同志movies_精品国产免费一区二区三区五区_性猛交xxxx乱大交孕妇免费看_wwwxxx国产 | 一级黄色片子看看_久久人力资源与普通版对比_日韩福利网_老熟仑妇乱视频一区二区_狠狠狠色狠狠色综合_久久久久久久久99精品_草逼大全_欧美无限看 |